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小鼠表皮調(diào)節(jié)素(EPR)ELISA試劑盒處理方法
閱讀:166 發(fā)布時間:2019-8-28小鼠表皮調(diào)節(jié)素(EPR)ELISA試劑盒說明書價格處理方法:
1.加樣:分別設空白孔,、標準孔,、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,,加樣時將樣品加于酶標板底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,。給酶標板覆膜,,37℃孵育2小時。為保證實驗結果有效性,,每次實驗請使用新的標準品溶液,。
2.棄去液體,甩干,,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),,酶標板加上覆膜,37℃溫育1小時,。
3.棄去孔內(nèi)液體,,甩干,洗板 3次,,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干,。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜,,37℃溫育1小時,。
5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,,洗板5次,,方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl,,酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯況酌情縮短或延長,,但不可超過30分鐘。當標準孔出現(xiàn)明顯梯度時,,即可終止),。
7.每孔加終止液50μl,,終止反應,此時藍色立轉(zhuǎn)黃色,。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同,。 8.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應提前打開酶標儀電源,,預熱儀器,,設置好檢測程序。
9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結束,。