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酶標(biāo)記物方法注意事項(xiàng)有哪些
閱讀:1149 發(fā)布時(shí)間:2019-3-13酶標(biāo)記物包括酶標(biāo)記抗原,、酶標(biāo)記抗體和酶標(biāo)記SPA等。酶標(biāo)記物質(zhì)量的好壞直接關(guān)系到免疫酶技術(shù)的成功與否,,因此被稱為關(guān)鍵的試劑,。酶標(biāo)記物中常用的是酶標(biāo)記抗體,它是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,。酶標(biāo)記抗體的質(zhì)量主要取決于純度好,、活性強(qiáng)及親和力高的酶和抗體,其次要有良好的制備方法,。目前,,高質(zhì)量的酶(如辣根過(guò)氧化物酶,簡(jiǎn)稱HRP)國(guó)內(nèi)已有商品供應(yīng),。高質(zhì)量的抗體則可通過(guò)提取純化而獲得,。在制備方法上,宜選用產(chǎn)率高,、不影響結(jié)合物的活性和不混雜干擾性物質(zhì)且操作簡(jiǎn)便易行的方法,。
注意事項(xiàng)
1. 在具備高質(zhì)量HRP的條件下,所要標(biāo)記的抗體也要活性高,效價(jià)高(低1∶16),純度
高,,親和力好,,這是保證標(biāo)記物效價(jià)高,,免疫活性好的首要條件。
2. 所使用試劑的PH和濃度及用量必須嚴(yán)格掌握,。所用試劑,,*(或必需)新鮮配
制。如在戊二醛標(biāo)記法中所用戊二醛應(yīng)為新鮮純品,,因戊二醛儲(chǔ)存過(guò)久可形成縮和體(雜
質(zhì)),。否則,影響標(biāo)記效果,。
3. 室溫?cái)嚢钑r(shí)須避光,,室內(nèi)溫度一般在25℃為宜。標(biāo)記物每次透析前,,須認(rèn)真檢
查,,防止漏液。
4. 濃的標(biāo)記物相當(dāng)穩(wěn)定,,常加入30~40%甘油于-10℃下保存,。4℃可保存1~2年,但稀釋成1∶10,,只能保存數(shù)周,。已配制的使用液應(yīng)在12小時(shí)內(nèi)用完。切忌反復(fù)凍融,。