化工儀器網(wǎng)
技術文章
原代細胞培養(yǎng)中的支原體污染的預防及處理
閱讀：969 發(fā)布時間：2018-6-19原代細胞培養(yǎng)（特別是傳代細胞）被支原體污染是個世界性問題。國內外研究表明,，95%以上是以下四種支原體：口腔支原體（M.orale）,、精氨酸支原體（M.arginini）、豬鼻支原體（M.hyorhinis）和菜氏無膽甾原體（A.laidlawii）,，為牛源性,。國外調查證明，大約有二十多種支原體能污染細胞,，有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體,。
支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染（某些支原體在人體是正常菌群）,、培養(yǎng)基的污染,、被污染細胞造成的交叉污染、實驗器材的污染,、制備細胞的原始組織或器官的污染,，等等。
組織細胞培養(yǎng)工作中,，可以從以下幾方面來預防支原體的污染：控制環(huán)境污染,；嚴格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌,；在細胞培養(yǎng)基沖加入適量的抗生素(antibiotic),。
抗生素(antibiotic)主要用于消毒培養(yǎng)液,，是培養(yǎng)過程中預防微生物污染的重要手段，也是微生物污染不嚴重時的“急救”方法,。不同抗生素(antibiotic)殺滅微生物不同,，應根據(jù)需要選擇。
在細胞培養(yǎng)過程中如果發(fā)現(xiàn)破碎的細胞甚多,，培養(yǎng)細胞需要頻繁改善營養(yǎng)環(huán)境才能支持長期傳代培養(yǎng)時,，應該懷疑支原體污染。支原體污染難以觀察特殊的外觀變化,，培養(yǎng)液也不渾濁,。
支原體污染原代細胞后，特別是重要的細胞株,，有必要清除支原體,，常用方法有：抗生素(antibiotic)處理、抗血清處理,、抗生素(antibiotic)加抗血清和補體聯(lián)合處理,。要注意的是：支原體沒有細胞壁(cell wall)，故作用于細胞壁(cell wall)生物合成的抗生素(antibiotic),，如內酰胺類,、萬古霉素等是不敏感的；對多粘菌素,、利福平,、磺胺藥物普遍耐火*。對支原體zui有抑制活性抗生素(antibiotic)是四環(huán)素類,、大環(huán)內酯類等,，氨基糖苷類、氯霉素對支原體有較小的抑制作用,。必要時更換所有培養(yǎng)用物,。通常，濾過除菌的方法對支原體是沒有作用的,。
MDM2 磷酸化肝細胞生長因子受體(原癌基因)抗體
MDR1/p-GP/CD243 (C-terminus) 磷酸化肝細胞生長因子受體(原癌基因)抗體
MDR1/p-GP/CD243 (N-terminus) 磷酸化肝細胞核因子4α抗體
ME1 磷酸化干擾素調節(jié)因子7抗體
Measles virus fusion protein 磷酸化干擾素調節(jié)因子3
MeCP2 磷酸化鈣介質素抗體
MEF2A 磷酸化鈣調節(jié)蛋白-1抗體
Megsin 磷酸化鈣/鈣調素依賴蛋白激酶CAMK2G抗體
MEK1/2(MAPKK1) 磷酸化鈣/鈣調素依賴蛋白激酶2α抗體
原代細胞