細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時(shí)間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化,;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,,加1ml凍存液重懸細(xì)胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,,超低比價(jià),,產(chǎn)品名稱貨期短,價(jià)格優(yōu),,售后齊全,。
產(chǎn)品名稱:肺大靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基
規(guī)格:100mL/125mL×4
貨號(hào):YS-02X9978
產(chǎn)品分類:細(xì)胞培養(yǎng)基
儲(chǔ)存條件2℃-8℃,避光儲(chǔ)存
運(yùn)輸條件冰袋冷藏運(yùn)輸
注意事項(xiàng)
1,、使用產(chǎn)品時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作,,避免污染。
2,、本產(chǎn)品含有血清和雙抗,,如無(wú)特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用,。
3,、為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果,不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4,、所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,,超出保質(zhì)期,必須放棄使用,。
5,、本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面,。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶,;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶,;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè),; 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞
3、50ml離心筒2個(gè)
4,、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,,200μl移液器各1支,;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6,、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊,;
7、滅好菌的鑷子1把,,剪刀1把,;
8、酒精燈1臺(tái),;
細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
1:水浴鍋預(yù)熱至37℃?zhèn)溆?/span>
2:準(zhǔn)備15mL離心管,,并向其中加入適量培養(yǎng)基待用
3:將細(xì)胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出,放入PE手套中,,迅速投入水浴鍋
4:用力搖晃凍存管,,使其在1分鐘內(nèi)融化
5:用紙巾擦拭水漬,轉(zhuǎn)移至生物安全柜,。用移液槍吸取細(xì)胞懸液,,緩慢滴加到步驟2中準(zhǔn)備好的離心管
6:1200rpm離心3分鐘
7:棄上清,用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,,接種至新的無(wú)菌培養(yǎng)器皿中
482-48-4異佛手柑內(nèi)酯 規(guī)格: 20mg
環(huán)丙星 對(duì)照品 規(guī)格: 100mg;99.8%
518-82-1大黃 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
唑林雜質(zhì)E 規(guī)格: 50mg
213991,3-二丙基-7-甲基黃 規(guī)格: HPLC≥99%,,20mg/vial
39011-90-0芍藥內(nèi)酯 規(guī)格: 20mg
磺胺甲噁唑 規(guī)格: 100mg
88191-48-4兒茶精合物 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
兒茶沒(méi)食子酯 規(guī)格: HPLC≥98%,5mg/支
虎杖(白黎蘆) 規(guī)格: 20mg
肺大靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基891986卡嗪 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
菟絲子對(duì)照藥材 規(guī)格: 1g
地克珠利 對(duì)照品 規(guī)格: 100mg;99.5%
64-86-8 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
旱蓮A 規(guī)格: 20mg
66280-25-9戈米辛J;Gomisin J 規(guī)格: 10mg
1818-71-9豆 規(guī)格: 20mg
128-37-02;6-二叔丁基對(duì);純品型;標(biāo)準(zhǔn)品- 規(guī)格: 0.25g
71626-11-4霜靈;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 規(guī)格: 0.1g
3681-99-0 規(guī)格: 20mg