詳細介紹
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
產品僅用于科研儲存條件:
14℃或-20℃
注意事項:1.基礎程序,;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間,;4.循環(huán)次數(shù),;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理,;7.PCR的反應動力學,;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件,。
產品名稱 | 轉基因品系玉米MIR162探針法qPCR試劑盒 |
英文名稱 | QPCR kit for MIR162 probe method of transgenic maize |
貨號 | YSP96633 |
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產品說明書 1份反應五要素:
產品僅用于科研參加PCR反應的物質主要有五種即引物,、酶、dNTP,、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度,。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,,常用為20bp左右,。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段,。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶,。ATG隨機分布,,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,,避免兩條引物間互補,,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,,產生非特異的擴增條帶,。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,,應嚴格要求配對,,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點,, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性,。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,,且可增加引物之間形成二聚體的機會,。
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性,。
其中引物與模板的正確結合是關鍵,。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,,結合的特異性大大增加,,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),,其特異性程度就更高,。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平,。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞,;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位),;在細菌學中小檢出率為3個細菌,。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,,一次性地將反應液加好后,,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應,。擴增產物一般用電泳分析,,不一定要用同位素,無放射性污染,、易推廣,。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板,??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液,、洗嗽液,、毛發(fā)、細胞,、活PCR技術概論,。
酵母銅ATP酶(Cu++ -ATPase)活性比色法量檢測試劑盒6次/盒外觀包裝:1kg/袋不可拆
植物銅ATP酶(Cu++ -ATPase)活性比色法量檢測試劑盒3×1ml外觀包裝:1000克/袋可拆
動物細胞P型ATP酶(P type ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒1ml(500X)外觀包裝:1000克/袋可拆
動物組織P型ATP酶(P type ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒500 ml外觀包裝:1000ML/瓶可拆
細菌P型ATP酶(P type ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒外觀包裝:1000ML/瓶可拆
酵母P型ATP酶(P type ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒6次/盒外觀包裝:無色液體
1KG/氟化瓶不可拆
植物P型ATP酶(P type ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒外觀包裝:500ml/瓶*20瓶/件可拆
動物細胞V型ATP酶(V type ATPase )活性比色法定量檢測試劑盒3×1ml外觀包裝:1kg/袋*20袋/箱可拆
動物組織V型ATP酶(V type ATPase )活性比色法定量檢測試劑盒6次/盒外觀包裝:1KG/袋可拆
酵母V型ATP酶(V type ATPase )活性比色法定量檢測試劑盒6次/盒外觀包裝:1kg/袋*25kg/包可拆
植物V型ATP酶(V type ATPase )活性比色法定量檢測試劑盒100ml外觀包裝:1kg/袋可拆
動物細胞線粒體F型ATP酶(F type ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒500 ml外觀包裝:200G/瓶x30瓶可拆
動物組織線粒體F型ATP酶(F type ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒外觀包裝:10kg/袋可拆
植物葉綠體F型ATP酶(F type ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒3×1ml外觀包裝:10kg/包裝可拆
細菌F型ATP酶(F type ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒外觀包裝:10kg/袋可拆
酵母F型ATP酶(F type ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒6次/盒外觀包裝:1000g/袋 20袋/件可拆
轉基因品系玉米MIR162探針法qPCR試劑盒8號染色體開放閱讀框80抗體 英文縮寫:CLCA4
9號染色體開放閱讀框3抗體 英文縮寫:CLCA4
8號染色體開放閱讀框47抗體 英文縮寫:CLCA4(Calcium-activated chloride channel 4)
8號染色體開放閱讀框48抗體 英文縮寫:CLCN2
8號染色體開放閱讀框58抗體 英文縮寫:CLCN3
8號染色體開放閱讀框74抗體 英文縮寫:CLCNKB
8號染色體開放閱讀框76抗體 英文縮寫:CLDN1(Claudin 1)
8號染色體開放閱讀框77抗體 英文縮寫:CLDN1(Claudin 1)C-term
6號染色體開放閱讀框97抗體 英文縮寫:CLDN25
補體C7抗體 英文縮寫:CLDND1