產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 說明書 |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 科研實驗 |
英文名稱 | Recombinant Coupling Factor 6 (CF6) | 物種 | Homo sapiens (Human,,人) |
來源 | 原核表達 | 應(yīng)用 | Cell culture; Activity Assa |
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上海研生實業(yè)有限公司 |
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參考價 | 面議 |
更新時間:2023-03-31 09:45:43瀏覽次數(shù):310
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 說明書 |
---|---|---|---|
應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 科研實驗 |
英文名稱 | Recombinant Coupling Factor 6 (CF6) | 物種 | Homo sapiens (Human,,人) |
來源 | 原核表達 | 應(yīng)用 | Cell culture; Activity Assa |
標簽選擇:
親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽,;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析,。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:
真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細胞瞬時轉(zhuǎn)染
e. 表達小試,條件優(yōu)化
f. 表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 性狀 | 來源 |
耦合因子6(CF6)重組蛋白 | Homo sapiens (Human,,人) | 凍干粉 | 原核表達 |
英文名稱:Recombinant Coupling Factor 6 (CF6)
ATP5J; ATP5A; ATP5; ATPM; ATP Synthase,H+ Transporting,Mitochondrial Fo Complex,Subunit F6; ATP synthase-coupling factor 6, mitochondrial
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,,人)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::線粒體
預(yù)測分子量:16.3kDa
實際分子量:16kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Met1~Ala108 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點:9.5
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg
相關(guān)產(chǎn)品:
琥珀酸脫氫酶復(fù)合體A亞基(SDHA)重組蛋白 物種; Mus musculus (Mouse,,小鼠) 來源,; 原核表達 性狀:凍干粉
膽綠素還原酶B(BLVRB)重組蛋白 物種; Homo sapiens (Human,,人) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉
神經(jīng)酰胺激酶(CERK)重組蛋白 物種,; Homo sapiens (Human,,人) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉
原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達菌株
e. 蛋白表達小試分析
f. 如果蛋白可溶,,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。
h. 鑒定,,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白,;表達蛋白的分析、純化,、檢測
誘導表達成功后,,表達蛋白的分析、純化,、檢測應(yīng)該順當,,按一般的實驗步驟做沒太大的問題。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加),。
1,、樣品前處理:
a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細胞充分接觸,。
b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散,。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀,。如果細胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,然后再裂解,。
c)對于組織樣品: 切成細小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,,直至充分裂解,。
2、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,,取上清,,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作,。
即雞包涵體肝炎病毒病毒PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Inclusion Body Hepatitis Virus(IBHV,FAVA)PCR
基孔肯尼雅病毒PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Chikungunya Virus(CHIKV)RTPCR
雞瘧原蟲PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Plasmodium gallinaceumPCR
雞白痢沙門氏菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Salmonella pullorumPCR
大鼠白介素28B(IL-28B)ELISA試劑盒 ,,英文名: IL-28B ELISA Kit
Mouse ierleukin 8 (IL-8/CXCL8) ELISA Kit 小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒
ELISA 小鼠類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-3(mouse IGBPF-3) 48T/96T 進口分裝
CLIAKitforIMA(HumanIschemiaModifiedAlbumin)ELISAKit人缺血修飾白蛋白規(guī)格:48T/96T
通用型胱(cystine)含量比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitINH-B大鼠抑制素B規(guī)格:48T/96T
耦合因子6(CF6)重組蛋白新孢子蟲通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Neospora spp.PCR
新城疫病毒=禽副粘病毒型PCR檢測試劑盒 英文名稱; Newcastle Disease Virus(NDV)(=1)RTPCR
新港沙門氏菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Salmonella newportPCR
新加坡石斑魚虹彩病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Singapore Grouper Iridovirus(SGIV)PCR
注意事項:
1,、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間,。
2,、雖然作用溫和,但能硬化組織,,固定時間過久會導致組織變脆,,切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果,。因此,,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復(fù),,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作,。
4、本產(chǎn)品對人體有害,,操作時請小心,,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5,、為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作