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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度,；3．反應(yīng)時(shí)間,；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制,；6．PCR技術(shù)的基本原理,；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件,。
產(chǎn)品名稱 | 轉(zhuǎn)基因品系小麥MON71800染料法qPCR試劑盒 |
英文名稱 | Dye qPCR kit for transgenic wheat line mon71800 |
貨號 | YSP96660 |
自備物品：
15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A） 毫升
染色液（t B） 微升
稀釋液（C） 毫升
溶解液（tD） 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合,；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性,；
④靶基因的特異性與保守性,。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的,。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加,，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度,。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高,。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞,；在病毒的檢測中,，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中小檢出率為3個(gè)細(xì)菌,。
(3) 簡便,、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后,，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,，不一定要用同位素,，無放射性污染、易推廣,。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
產(chǎn)品僅用于科研不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液,、體腔液、洗嗽液,、毛發(fā),、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論,。
動物細(xì)胞/組織異檸檬酸脫氫酶（isocitrate dehydrogenase,；IDH）電泳分析試劑盒100ml外觀包裝：棕色粉狀
25KG/紙板桶可拆
植物異檸檬酸脫氫酶（isocitrate dehydrogenase；IDH）電泳分析試劑盒外觀包裝：棕色粉狀
25KG/紙板桶可拆
動物細(xì)胞/組織亮氨酸氨基肽酶（leucine aminopeptidase；LAP）電泳分析試劑盒外觀包裝：棕色粉狀
25KG/紙板桶可拆
植物亮氨酸氨基肽酶（leucine aminopeptidase,；LAP）電泳分析試劑盒1ml（500X）外觀包裝：棕色粉狀
25KG/紙板桶可拆
動物細(xì)胞/組織甘露糖6-磷酸異構(gòu)酶（mannose－6－phosphate isomerase,；MPI）電泳分析試劑盒外觀包裝：淡紅粉狀
25KG/紙板桶可拆
植物甘露糖6-磷酸異構(gòu)酶（mannose－6－phosphate isomerase；MPI）電泳分析試劑盒外觀包裝：棕色粉狀
25KG/紙板桶可拆
動物細(xì)胞/組織磷酸葡萄糖酸脫氫酶（phosphogluconate dehydrogenase,；PGD）電泳分析試劑盒1ml（500X）外觀包裝：白色粉狀
25KG/紙板桶可拆
植物磷酸葡萄糖酸脫氫酶（phosphogluconate dehydrogenase,；PGD）電泳分析試劑盒500 ml外觀包裝：白色粉狀
25KG/紙板桶可拆
動物細(xì)胞/組織葡萄糖磷酸變位酶（phosphoglucomutase；PGM）電泳分析試劑盒外觀包裝：白色粉狀
25KG/紙板桶可拆
植物葡萄糖磷酸變位酶（phosphoglucomutase,；PGM）電泳分析試劑盒外觀包裝：白色顆粒
25KG/紙板桶可拆
動物細(xì)胞/組織莽草酸脫氫酶（shikimate dehydrogenase,；SkDH）電泳分析試劑盒外觀包裝：白色粉狀
25KG/紙板桶可拆
植物莽草酸脫氫酶（shikimate dehydrogenase；SkDH）電泳分析試劑盒外觀包裝：白色粉狀
25KG/紙板桶可拆
血紅蛋白分型外觀包裝：白色粉狀
25KG/紙板桶可拆
二苯胺（DPA）DNA比色定量測定試劑盒外觀包裝：白色粉狀
25KG/紙板桶可拆
二氨基苯甲酸（DABA）DNA比色定量測定試劑盒500 ml外觀包裝：黃色粉狀
25KG/紙板桶可拆
通用型糖類總量鐵物比色法定量檢測試劑盒6次/盒外觀包裝：白色粉狀
25KG/紙板桶可拆
轉(zhuǎn)基因品系小麥MON71800染料法qPCR試劑盒CD10抗體 英文縮寫：Crk p38
CD105抗體 英文縮寫：CRK7
干細(xì)胞生長因子受體/細(xì)胞表面分化抗原抗體 英文縮寫：Crkl
氯離子通道蛋白2抗體 英文縮寫：CRLF1
細(xì)胞角蛋白5抗體 英文縮寫：CRLF2
細(xì)胞角蛋白8抗體 英文縮寫：CRLF2
c-mer原癌基因酪氨酸激酶抗體 英文縮寫：CRLR
Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣素抗體 英文縮寫：CRLR/CALCRL(calcitonin receptor like precursor)
Ⅲ型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白抗體 英文縮寫：CRMP1
IV型膠原蛋白/4型膠原蛋白/膠原蛋白4抗體 英文縮寫：CRMP2
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物,、酶、dNTP,、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,，只要知道任何一段模板DNA序列,， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增,。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp,，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜,，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段,。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳,，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶,。ATG隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ),，否則會形成引物二聚體,，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性,。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol,，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會,。
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