詳細介紹
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
產(chǎn)品名稱 | 轉(zhuǎn)基因品系棉花COT102染料法qPCR試劑盒 |
英文名稱 | Cot102 dye qPCR kit for transgenic cotton |
貨號 | YSP96692 |
?自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
產(chǎn)品僅用于科研注意事項:1.基礎程序,;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間,;4.循環(huán)次數(shù),;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理,;7.PCR的反應動力學,;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件,。
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合,;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性,。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的,。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度,。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),,其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平,。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位),;在細菌學中小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便,、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,,一般在2~4 小時完成擴增反應,。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,,無放射性污染,、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板,。可直接用臨床標本如血液,、體腔液,、洗嗽液、毛發(fā),、細胞,、活PCR技術概論。反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物,、酶,、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度,。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,,常用為20bp左右,。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段,。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,,G+C太少擴增效果不佳,,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATG隨機分布,,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,,特別是3'端的互補,,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶,。
⑤引物3'端的堿基,,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點,, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性,。
產(chǎn)品僅用于科研引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,,以低引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,,且可增加引物之間形成二聚體的機會,。
X框結合蛋白1(XBP1)(學發(fā)光免疫分析法)Dihidromethysticin純度:≥98%
X框結合蛋白1(XBP1)(學發(fā)光免疫分析法)Dihydrolycorine純度:≥98%
X連鎖凋亡蛋白抑制因子(XIAP)(學發(fā)光免疫分析法)Dihydrokavain純度:≥99%
X射線修復交叉互補蛋白6(XRCC6)(學發(fā)光免疫分析法)Lycopene純度:≥95%
X射線修復交叉互補蛋白6(XRCC6)(學發(fā)光免疫分析法)Bakkenolide純度:≥98%
α1抗胰蛋白酶(α1AT)(學發(fā)光免疫分析法)Glycine純度:≥98%
α1微球蛋白(α1M)(學發(fā)光免疫分析法)Liguiritigenin7ODapiosyl4’ODglucoside純度:95%
E2 tag E2 tag標簽 * 0.1ml Oridonin
HPV16 E7 protein 人瘤病毒16型E7 * 0.1ml Helicid
ADAMTS9 整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶9型 * 0.1ml Stigmasterol
ADAMTSL1 整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶樣1蛋白 * 0.2ml Stigmasterol
EAAT1/Glast 膠質(zhì)細胞谷運載蛋白1 * 0.1ml Stigmasterol
EAAT2 膠質(zhì)細胞谷運載蛋白2 * 0.1ml Nitrovin HCL,Difurazone
EAAT3 膠質(zhì)細胞谷運載蛋白3(神經(jīng)/上皮細胞谷運載蛋白) * 0.1ml Farrerol
EBNA 3A EB病毒核抗原3A * 0.2ml pCoumaric acid
轉(zhuǎn)基因品系棉花COT102染料法qPCR試劑盒磷酸化D酪氨酸激酶衰減蛋白1抗體 英文縮寫:DAPP1
磷酸化Fas相關死亡結構域蛋白抗體 英文縮寫:DARC
磷酸化D酪氨酸激酶衰減蛋白1抗體 英文縮寫:DARPP32
磷酸化Fas相關死亡結構域蛋白抗體 英文縮寫:DAT
磷酸化Fas相關死亡結構域蛋白抗體 英文縮寫:DAT1
磷酸化Fas相關死亡結構域蛋白抗體 英文縮寫:DATF1
磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體 英文縮寫:DAXX
磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體 英文縮寫:DAZ1
磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體 英文縮寫:DAZ4
7脫氫膽固醇還原酶抗體 英文縮寫:DAZL