詳細介紹
產(chǎn)品僅用于科研注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度,;3.反應時間,;4.循環(huán)次數(shù),;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理,;7.PCR的反應動力學,;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件,。
產(chǎn)品名稱 | 轉(zhuǎn)基因品系大豆DP356043染料法qPCR試劑盒 |
英文名稱 | Dyestuff qPCR kit for transgenic soybean dp356043 |
貨號 | YSP96673 |
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合,;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性,。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的,。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,,使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度,。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高,。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平,。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞,;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位),;在細菌學中小檢出率為3個細菌,。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,,一次性地將反應液加好后,,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應,。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,,不一定要用同位素,無放射性污染,、易推廣,。
(4) 對標本的純度要求低
產(chǎn)品僅用于科研不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板,。可直接用臨床標本如血液、體腔液,、洗嗽液、毛發(fā),、細胞、活PCR技術(shù)概論,。
細胞周期素G2(CCNG2) 規(guī)格:1g 英文:SDF1
細胞周期素H(CCNH) 規(guī)格:1g 英文:STAG3
細胞周期素I(CCNI) 規(guī)格:1.0g 英文:STAG2
細胞周期素I2(CCNI2) 規(guī)格:1.5g 英文:STAG1
細胞周期素J(CCNJ) 規(guī)格:20mg 英文:MMP9
細胞周期素K(CCNK) 規(guī)格:20mg 英文:MMP8
細胞周期素L1(CCNL1) 規(guī)格:1ml 英文:MMP7
細胞周期素L2(CCNL2) 規(guī)格:2.2ml/支 英文:MMP3
細胞周期素M1(CCNM1) 規(guī)格:2g 英文:MMP28
細胞周期素M2(CCNM2) 規(guī)格:100mg 英文:MMP27
細胞周期素M3(CCNM3) 規(guī)格:100mg 英文:MMP26
細胞周期素M4(CCNM4) 規(guī)格:1mg/支 英文:MMP24
細胞周期素O(CCNO) 規(guī)格:HPLC≥98%,20mg/支 英文:MMP23B
細胞周期素T(CCNT) 規(guī)格:HPLC≥98%,20mg/支 英文:MMP23A
細胞周期素T2(CCNT2) 規(guī)格:HPLC≥98%;5mg/支 英文:MMP21
Drospirenone己二酸(Standard for GC,≥99.5%(GC)) 分子式:C8H6O4 純度:99.0%
Lynestrenol乙酰胺(Standard for GC,≥99.5%(GC)) 分子式:C8H10O3 純度:98.0%
Norethindrone茴香醛(Standard for GC,≥99%(GC)) 分子式:C18H12O9 性狀:Yellow powder 純度:95.0%
Allylestrenol癸二酸二辛酯(DOS)(Standard for GC, ≥98.5% (GC)) 分子式:C14H20O7 純度:98.0%
Estradiol diproppionate1,,4-丁二醇(BDO)(standard for GC,≥99%(GC)) 分子式:C7H6O3 純度:99.0%
Estradiol-3-benzoate-17-butyrate1,2,4-丁三醇(BT)(standard for GC,≥99.5%(GC)) 分子式:C16H16O3 純度:99.0%
Estradiol hexahydrobenzoate癸酸甲酯(Standard for GC ,≥99.5%(GC)) 分子式:C11H14O3 純度:97.0%
Estradiol heptanoate月桂酸甲酯(Standard for GC,≥99.5%(GC)) 分子式:C13H16O8 純度:98.0%
Estradiol valerate棕櫚酸甲酯(Standard for GC,≥98.0%(GC)) 分子式:C27H40O2 性狀:Oil 純度:97.5%
轉(zhuǎn)基因品系大豆DP356043染料法qPCR試劑盒唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素5抗體 英文縮寫:Cux2
CD329抗體 英文縮寫:CWC22
嗜酸粒細胞趨化蛋白14抗體 英文縮寫:CWF19L1
1號染色體開放閱讀框57抗體 英文縮寫:CWH43
2號染色體開放閱讀框18抗體 英文縮寫:Cx32(Connexin-32)
細胞色素c氧化酶6抗體 英文縮寫:CX36 (Connexin-36)
嗜酸粒細胞趨化蛋白24抗體 英文縮寫:CX3CL1
巨噬細胞炎性蛋白15 英文縮寫:cx3cl1(chemokine (C-X3-C motif) ligand 1)
巨噬細胞炎性蛋白抗體 英文縮寫:CX3CR1
CD72蛋白抗體 英文縮寫:CX3CR1(CX3C-chemokine receptor 1)
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶,、dNTP,、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度,。理論上,,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增,。設(shè)計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右,。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,,G+C太少擴增效果不佳,,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATG隨機分布,,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,,特別是3'端的互補,,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶,。
⑤引物3'端的堿基,,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點,, 這對酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會,。