詳細介紹
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
產(chǎn)品名稱 | 轉(zhuǎn)基因品系南瓜CZW-3 PCR試劑盒 |
英文名稱 | Czw-3 PCR kit for transgenic pumpkin |
貨號 | YSP96778 |
?自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
產(chǎn)品僅用于科研注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度,;3.反應(yīng)時間,;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制,;6.PCR技術(shù)的基本原理,;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物,;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件,。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的,。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度,。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高,。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞,;在病毒的檢測中,,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中小檢出率為3個細菌,。
(3) 簡便,、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),,一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,,不一定要用同位素,,無放射性污染、易推廣,。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液,、體腔液、洗嗽液,、毛發(fā),、細胞、活PCR技術(shù)概論,。反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物,、酶、dNTP,、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度,。理論上,,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增,。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,,特定條件下可擴增長至10kb的片段,。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶,。ATG隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列,。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,,否則會形成引物二聚體,,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性,。
產(chǎn)品僅用于科研引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
白介素4(IL4) 規(guī)格:20mg 英文:WNT3A
白介素4(IL4) 規(guī)格:1g 英文:RelB
白介素4(IL4) 規(guī)格:20mg 英文:VAV3
白介素4(IL4) 規(guī)格:50mg 英文:RAD23A
白介素4受體(IL4R) 規(guī)格:100mg 英文:SNRPA
白介素4誘導(dǎo)蛋白1(IL4I1) 規(guī)格:20mg 英文:Tgtp
白介素5(IL5) 規(guī)格:100mg 英文:TCR
白介素5(IL5) 規(guī)格:100mg 英文:TALLA-1/CD231
白介素5(IL5) 規(guī)格:170ng/支 英文:LAT
白介素5(IL5) 規(guī)格:1000mg 英文:CD1A
白介素5(IL5) 規(guī)格:3g 英文:TU3A
白介素5(IL5) 規(guī)格:1000mg 英文:TREML1
白介素5(IL5) 規(guī)格:100mg 英文:T2BP
白介素5(IL5) 規(guī)格:200mg 英文:TOLLIP
白介素5(IL5) 規(guī)格:50mg 英文:TLR-9/CD289
Ermanin醋酸環(huán)丙孕酮(標(biāo)準(zhǔn)品) 分子式:C18H19NO5 純度:97.0%
Mearnsetin甲地孕酮 分子式:C19H22N2O3 純度:97.5%
4',5-Dihydroxy-3',5',6,7-tetramethoxyflavone甲地孕酮(標(biāo)準(zhǔn)品) 分子式:C17H17NO4 純度:98.0%
Kaempferol 7,4'-dimethyl ether3-縮酮 分子式: 性狀:C20H19N2O3 純度:97.5%
2''-O-Coumaroyljuglanin索拉非尼 分子式:C19H21NO5 純度:97.0%
Heveaflavone二磷酸組胺,;磷酸組胺 分子式:C21H24N2O3 純度:98.0%
Isochamaejasmin磷酸氯喹,氯喹二磷酸鹽 分子式:C13H11NO 純度:%
7-Hydroxy-5,8-dimethoxyflavanone(-)-莨菪堿,L-天仙子胺,,L-天仙子堿 分子式:C13H9NO3 性狀:Yellow powder 純度:97.5%
7,4'-Di-O-methylapigenin(-)-莨菪堿,L-天仙子胺,澳洲毒茄堿(標(biāo)準(zhǔn)品) 分子式:C13H9NO2 性狀:Yellow powder 純度:97.0%
轉(zhuǎn)基因品系南瓜CZW-3 PCR試劑盒范可尼綜合征相關(guān)蛋白FANCC抗體 英文縮寫:FAM107A
FXYD離子轉(zhuǎn)運調(diào)節(jié)因子6抗體 英文縮寫:FAM113A
Fyn結(jié)合蛋白抗體 英文縮寫:FAM120B
鋅指蛋白FYCO1抗體 英文縮寫:FAM120C
FYTTD1蛋白抗體 英文縮寫:FAM123B
RNA結(jié)合蛋白9抗體 英文縮寫:FAM123B
巖藻糖轉(zhuǎn)移酶11抗體 英文縮寫:FAM126A
干擾素誘導(dǎo)蛋白15抗體 英文縮寫:FAM129A
P38相互作用蛋白抗體 英文縮寫:FAM129B
鈣粘樣蛋白28抗體 英文縮寫:FAM134B