產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 說明書 |
---|---|---|---|
應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 科研實(shí)驗(yàn) |
英文名稱 | Recombinant Extracellular Signal Regulated Ki | 物種 | Rattus norvegicus (Rat,大鼠) |
來源 | 原核表達(dá) | 應(yīng)用 | Cell culture; Activity Assa |
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上海研生實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-03-31 10:42:05瀏覽次數(shù):317
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 說明書 |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 科研實(shí)驗(yàn) |
英文名稱 | Recombinant Extracellular Signal Regulated Ki | 物種 | Rattus norvegicus (Rat,大鼠) |
來源 | 原核表達(dá) | 應(yīng)用 | Cell culture; Activity Assa |
僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 性狀 | 來源 |
細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶2(ERK2)重組蛋白 | Rattus norvegicus (Rat,,大鼠) | 凍干粉 | 原核表達(dá) |
英文名稱:Recombinant Extracellular Signal Regulated Kinase 2 (ERK2)
MAPK1; P38; P40; ERK2; ERT1; MAPK2; P42MAPK; P42-MAPK; PRKM1; PRKM2; P41; P41mapk; P41-mapk; Mitogen-Activated Protein Kinase 1; Mitogen-activated protein kinase 2
信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 酶與激酶 腫瘤免疫
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜, 細(xì)胞核, 細(xì)胞質(zhì)
預(yù)測分子量:42.8kDa
實(shí)際分子量:43kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Tyr23~Ser358 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點(diǎn):7.0
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg
標(biāo)簽選擇:
親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá),。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析,。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:
真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達(dá)載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染
e. 表達(dá)小試,,條件優(yōu)化
f. 表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達(dá)
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株
e. 蛋白表達(dá)小試分析
f. 如果蛋白可溶,,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白,。
h. 鑒定,,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白;表達(dá)蛋白的分析、純化,、檢測
誘導(dǎo)表達(dá)成功后,,表達(dá)蛋白的分析、純化,、檢測應(yīng)該順當(dāng),,按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題。
注意事項(xiàng):
1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間,。
2,、雖然作用溫和,但能硬化組織,,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時,。
3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結(jié)果,。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時,,有時需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),,然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。
4,、本產(chǎn)品對人體有害,,操作時請小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。
5,、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作
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操作步驟 :
根據(jù)使用量,,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,?;靹騻溆茫?span>PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。
1,、樣品前處理:
a)對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸,。
b)對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞,。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,,然后再裂解。
c)對于組織樣品: 切成細(xì)小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當(dāng)減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解,。
2,、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作,。
普羅威登斯菌通用PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Providencia spp.PCR
氣管比翼線蟲PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Syngamus tracheaPCR
槍狀肝吸蟲PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Dicrocoelium dentriticumPCR
禽阿爾法皰疹病毒型=馬立克病病毒PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Gallid Alphaherpesvirus 2 (GaHV2)2(=)PCR
大鼠B因子(BF)ELISA試劑盒 ,,英文名: BF ELISA Kit
Mouse Leptospira IgG (Lebtospira) ELISA Kit 小鼠鉤端IgG(Lebtospira)ELISA試劑盒
MouseSomalcellderivedfactor1a,SDF-1aELISAKit 小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumananspoerassociatedwithaigenprocessing,TAPELISAKit人抗原提呈相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/T細(xì)胞活化蛋白規(guī)格:48T/96T
通用型懸鉤子叢矮病毒(RaspberryBushyDwarfVirus;RBDV)試劑盒20次
ELISAKitT3大鼠狀腺原規(guī)格:48T/96T
細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶2(ERK2)重組蛋白蒼白密梅毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Treponema pallidum()PCR
差異脲原體PCR檢測試劑盒 英文名稱; Ureaplasma diversumPCR
產(chǎn)堿普羅威登斯菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Providencia alcalifaciensPCR
產(chǎn)氣克雷伯氏菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Klebsiella aerogenesPCR