產品簡介
供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 詳見說明書 |
---|---|---|---|
應用領域 | 化工 | 主要用途 | 科研 |
英文名稱 | Recombinant NADH Dehydrogenase, Quinone 1 (NQ | 物種 | Homo sapiens (Human,人) |
來源 | 原核表達 | 應用 | Cell culture; Activity Assa |
![]() |
上海研生實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-03-30 13:52:39瀏覽次數:432
聯系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,,謝謝!
供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 詳見說明書 |
---|---|---|---|
應用領域 | 化工 | 主要用途 | 科研 |
英文名稱 | Recombinant NADH Dehydrogenase, Quinone 1 (NQ | 物種 | Homo sapiens (Human,人) |
來源 | 原核表達 | 應用 | Cell culture; Activity Assa |
標簽選擇:
親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽,;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達,。使用不同的蛋白標簽需要根據具體案例來分析。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:
真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達載體的構建
c. 無內毒素的質粒抽提
d. 細胞瞬時轉染
e. 表達小試,,條件優(yōu)化
f. 表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
僅供科研實驗產品屬性:
產品名稱 | 物種 | 性狀 | 來源 |
醌NADH脫氫酶1(NQO1)重組蛋白 | Homo sapiens (Human,,人) | 凍干粉 | 原核表達 |
英文名稱:Recombinant NADH Dehydrogenase, Quinone 1 (NQO1)
DHQU; DIA4; DTD; NMOR1; NMORI; QR1; Azoreductase; DT-diaphorase; Menadione reductase; Phylloquinone reductase; Quinone reductase 1; NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達
宿主E.coli
內毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::細胞質
預測分子量:34.4kDa
實際分子量:32kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Val2~Lys274 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點:8.9
應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg
相關產品:
纖溶酶/抗纖溶酶復合體(PAP)重組蛋白 物種,; Homo sapiens (Human,,人) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉
非組織特異性堿性磷酸酶(ALPL)重組蛋白 物種,; Bos taurus; Bovine (Cattle,,牛) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉
酸性磷酸酶1(ACP1)重組蛋白 物種,; Mus musculus (Mouse,,小鼠) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉
原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉化表達菌株
e. 蛋白表達小試分析
f. 如果蛋白可溶,,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,,則需要變復性來制備可溶蛋白。
h. 鑒定,,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白,;表達蛋白的分析、純化,、檢測
誘導表達成功后,,表達蛋白的分析、純化,、檢測應該順當,,按一般的實驗步驟做沒太大的問題。
操作步驟 :
根據使用量,,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫?span>PMSF 現用現加),。
1、樣品前處理:
a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,,用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數下,,使裂解液和細胞充分接觸。
b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,,用手指把細胞用力彈散,。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞,。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀,。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,,然后再裂解,。
c)對于組織樣品: 切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,,直至充分裂解。
2,、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,,取上清,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作。
胎兒彎曲桿菌性病亞種PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Campylobacter fetus subsp. VenerealisPCR
索氏梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Clostridium sordelliiPCR
蘇丹埃博拉病毒PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Sudan Ebola Virus RTPCR
斯氏普羅威登斯菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Providencia stuartiPCR
大鼠血小板內皮細胞粘附分子1(PECAM1)ELISA試劑盒 ,,英文名: PECAM1 ELISA Kit
Mouse coagulation (F x) ELISA Kit 小鼠Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒
MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein4,IGFBP-4ELISAkit 小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumancoagulationfactorIX,FIXELISAKit人Ⅸ規(guī)格:48T/96T
細胞CDK5/P35活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitCR大鼠鈣結合蛋白規(guī)格:48T/96T
醌NADH脫氫酶1(NQO1)重組蛋白東方泰勒蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Theileria orientalisPCR
都柏林沙門氏菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Salmonella dublinPCR
痘苗病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Vaccinia Virus(VV)PCR
杜克雷嗜血桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Haemophilus ducreyiPCR
注意事項:
1,、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應當根據細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間,。
2,、雖然作用溫和,但能硬化組織,,固定時間過久會導致組織變脆,,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時,。
3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構象出現空間障礙,。分子間交聯形成的網格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結果,。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,,有時需要對抗原先進行修復,,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
4,、本產品對人體有害,,操作時請小心,,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。
5,、為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作