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醌NADH脫氫酶1(NQO1)重組蛋白

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更新時間:2023-03-30 13:52:39瀏覽次數:432

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產品簡介

供貨周期 現貨 規(guī)格 詳見說明書
應用領域 化工 主要用途 科研
英文名稱 Recombinant NADH Dehydrogenase, Quinone 1 (NQ 物種 Homo sapiens (Human,人)
來源 原核表達 應用 Cell culture; Activity Assa
醌NADH脫氫酶1(NQO1)重組蛋白的相關產品:核糖核酸酶P(RNASEP)重組蛋白 物種,; Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉 大型多功能肽酶7(LMP7)重組蛋白 物種,; Homo sapiens (Human,人) 來源,; 原核表達 性狀:凍干粉 吡哆醛激酶(PDXK)重組蛋白 物種,; Homo sapiens (Human,人) 來源,;

詳細介紹

標簽選擇:

親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽,;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達,。使用不同的蛋白標簽需要根據具體案例來分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:

真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

a.      選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHOHEK293

b.      表達載體的構建

c.      無內毒素的質粒抽提

d.      細胞瞬時轉染

e.      表達小試,,條件優(yōu)化

f.       表達分析和鑒定(SDS-PGAEWB

g.      大量表達

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

僅供科研實驗產品屬性:

產品名稱

物種

性狀

來源

NADH脫氫酶1(NQO1)重組蛋白

Homo sapiens (Human,,人)

凍干粉

原核表達

英文名稱:Recombinant NADH Dehydrogenase, Quinone 1 (NQO1)

DHQU; DIA4; DTD; NMOR1; NMORI; QR1; Azoreductase; DT-diaphorase; Menadione reductase; Phylloquinone reductase; Quinone reductase 1; NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達

宿主E.coli

內毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位::細胞質

預測分子量:34.4kDa

實際分子量:32kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽:Val2~Lys274 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% TrehaloseProclin300

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點:8.9

應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

相關產品:

纖溶酶/抗纖溶酶復合體(PAP)重組蛋白 物種,; Homo sapiens (Human,,人) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉

非組織特異性堿性磷酸酶(ALPL)重組蛋白 物種,; Bos taurus; Bovine (Cattle,,牛) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉

酸性磷酸酶1(ACP1)重組蛋白 物種,; Mus musculus (Mouse,,小鼠) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉

1.png

原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

a.      選擇表達載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉化表達菌株

e.      蛋白表達小試分析

f.       如果蛋白可溶,,蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,,則需要變復性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定,,包括SDS-PAGEWB鑒定

GZMH蛋白,;表達蛋白的分析、純化,、檢測

  誘導表達成功后,,表達蛋白的分析、純化,、檢測應該順當,,按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

操作步驟 :

根據使用量,,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫?span>PMSF 現用現加),。

1、樣品前處理:

a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,,用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數下,,使裂解液和細胞充分接觸。

b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,,用手指把細胞用力彈散,。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞,。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀,。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,,然后再裂解,。

c)對于組織樣品: 切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,,直至充分裂解。

2,、后處理:

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,,取上清,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作。

胎兒彎曲桿菌性病亞種PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Campylobacter fetus subsp. VenerealisPCR

索氏梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Clostridium sordelliiPCR

蘇丹埃博拉病毒PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Sudan Ebola Virus RTPCR

斯氏普羅威登斯菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Providencia stuartiPCR

大鼠血小板內皮細胞粘附分子1(PECAM1)ELISA試劑盒 ,,英文名: PECAM1 ELISA Kit

Mouse coagulation (F x) ELISA Kit 小鼠Ⅹ(F)ELISA試劑盒

MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein4,IGFBP-4ELISAkit 小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumancoagulationfactorIX,FIXELISAKit人Ⅸ規(guī)格:48T/96T

細胞CDK5/P35活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

ELISAKitCR大鼠鈣結合蛋白規(guī)格:48T/96T

NADH脫氫酶1(NQO1)重組蛋白東方泰勒蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Theileria orientalisPCR

都柏林沙門氏菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Salmonella dublinPCR

痘苗病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Vaccinia Virus(VV)PCR

杜克雷嗜血桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Haemophilus ducreyiPCR

注意事項:  

1,、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應當根據細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間,。

2,、雖然作用溫和,但能硬化組織,,固定時間過久會導致組織變脆,,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時,。

3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構象出現空間障礙,。分子間交聯形成的網格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結果,。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,,有時需要對抗原先進行修復,,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。

4,、本產品對人體有害,,操作時請小心,,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。

5,、為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作


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