高分子量激肽原(HMWK)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品：γ-分泌激活蛋白(gSAP)重組蛋白 物種,； Homo sapiens (Human,，人) 來源； 原核表達 性狀：凍干粉 透明質(zhì)酸氨基葡糖苷酶1(HYAL1)重組蛋白 物種,； Mus musculus (Mouse，小鼠) 來源,； 原核表達 性狀：凍干粉 蛋白激酶N1(PKN1)重組蛋白 物種,； Homo sapiens (Human，人) 來源,；

標(biāo)簽選擇：

親和標(biāo)簽：蛋白重組表達過程中采用親和標(biāo)簽融合表達有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,；另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類：一類是短肽類標(biāo)簽,；一類是長肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達,。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,，大致步驟如下：

真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體和宿主細胞（常用的CHO和HEK293）

b.      表達載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細胞瞬時轉(zhuǎn)染

e.      表達小試,，條件優(yōu)化

f.       表達分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）

g.      大量表達

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

僅供科研實驗產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant High Molecular Weight Kininogen (HMWK)

Williams-Fitzgerald-Flaujeac Factor; Fitzgerald Factor; HMWK-Kallikrein Factor

酶與激酶 血液病學(xué)

物種：Homo sapiens (Human,，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：n/a

預(yù)測分子量：14.5kDa

實際分子量：15kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Arg58~Leu176 (Accession # P01042) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4,，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

相關(guān)產(chǎn)品：

蛋白二硫化物異構(gòu)酶A2(PDI)重組蛋白 物種； Homo sapiens (Human,，人) 來源,； 原核表達 性狀：凍干粉

天青殺素(AZU)重組蛋白 物種； Homo sapiens (Human,，人) 來源,； 原核表達 性狀：凍干粉

葡萄糖苷酸酶β(GUSb)重組蛋白 物種； Homo sapiens (Human,，人) 來源,； 原核表達 性狀：凍干粉

原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達菌株

e.      蛋白表達小試分析

f.       如果蛋白可溶,，蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,，則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定,，包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白,；表達蛋白的分析、純化,、檢測

　　誘導(dǎo)表達成功后,，表達蛋白的分析、純化,、檢測應(yīng)該順當(dāng),，按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

操作步驟 ：

根據(jù)使用量,，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,。混勻備用（PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加）,。

1,、樣品前處理：

a)對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,，使裂解液和細胞充分接觸,。

b)對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散,。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,，再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀,。如果細胞量較多,，必需分裝成 50-100 萬細胞/管，然后再裂解,。

c)對于組織樣品： 切成細小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,，如果需要高濃度的蛋白樣品,，可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,，直至充分裂解,。

2、后處理：

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,，取上清,，即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作,。

嬰兒利什曼蟲PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Leishmania infantumPCR

陰道毛滴蟲PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Trichomonas vaginaliPCR

乙型肝炎病毒型PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Hepatitis B Virus(HBV)APCR

衣阿華支原體PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Mycoplasma iowaePCR

大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白5(IGFBP5)ELISA試劑盒 ，英文名： IGFBP5 ELISA Kit

Mouse endostatin (ES) ELISA Kit 小鼠內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒

MouseThrombopoietin,TPOELISAkit 小鼠血小板生成素(TPO)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanCyclin-D2ELISAKit人細胞周期素D2規(guī)格：48T/96T

細胞AURORA-B活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitBMP-6大鼠骨形成蛋白6規(guī)格：48T/96T

高分子量激肽原(HMWK)重組蛋白傳染性支氣管炎病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Infectious Bronchitis Virus(IBV)RTPCR

純綠青霉PCR檢測試劑盒 英文名稱; Penicillium viridicatumPCR

唇飾帶線蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Cheilospirura hamulosaPCR

刺激隱核蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Cryptocaryon irritansPCR

注意事項：  

1,、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2,、雖然作用溫和,，但能硬化組織，固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,，切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時,。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露,，可造成假陰性的染色,，影響免疫組化結(jié)果。因此,，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,，有時需要對抗原先進行修復(fù)，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作,。

4,、本產(chǎn)品對人體有害，操作時請小心,，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。

5、為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作