詳細(xì)介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定,。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外,,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果,。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素,;
③操作因素,。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù),!
產(chǎn)品名稱:鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原2免費(fèi)代測(cè)試劑盒說明
英文名稱:squamous cell carcinoma related antigen2
檢測(cè)范圍:125pg/mL~4000pg/mL
貨號(hào):YS-E989529
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個(gè)月,,所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分:酶標(biāo)板,,試劑,,標(biāo)準(zhǔn)品等。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個(gè)標(biāo)本-2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-84個(gè)樣本
48T指可以做47個(gè)標(biāo)本-1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-42個(gè)樣本
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等,。
試劑盒種屬:馬鈴薯,、鹿、羊,、雞,、鴨、魚,、人,、大鼠、小鼠,、豚鼠,、倉鼠、裸鼠,、兔子,、豬、犬,、猴,、馬、牛等動(dòng)植物,。
檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、灌洗液,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個(gè) |
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L | 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1,、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次,;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),,浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,,重復(fù)此過程數(shù)次,。
2、自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中,。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測(cè)效果,,因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的,,不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會(huì)得到的檢測(cè)結(jié)果,。
4,、在儲(chǔ)存及孵育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,,試劑避免受到微生物的污染,,因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。
5,、濃洗滌液會(huì)有鹽析出,,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
6,、剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會(huì)有少許水樣物質(zhì),,此為正常現(xiàn)象,,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響,。
7、所有的樣品都應(yīng)管理好,,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置,。
8、有效期:6個(gè)月,。
貂源細(xì)胞米格列奈鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Mitiglinide calcium Hydrate
MMP7 Others Human MMP7 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 丙基硫氧嘧 /6-正丙基-2-硫代尿嘧質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRPropylthiouracil
CM-R052大鼠平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL環(huán)嗪酮(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%Hexazinone
RSPO2 Others Human FTLS / RSPO2 (186 Leu/Pro) 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 氯吡嘧磺?。?biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%Halosulfuron-methyl
小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL噻螨酮(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5% Hexythiazox
小鼠神經(jīng)皮質(zhì)細(xì)胞(MN-c)(1×106) LncaP, 前列腺癌細(xì)胞 Human二氧化錫(> 99%,BR)質(zhì)量規(guī)格:> 99%,BRTin (IV) oxide
豚鼠胚胎細(xì)胞;104C1亞鈦(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRTitanium (III) sulfate
FKBP7 Others Human PPIase / FKBP7 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鈦(>96%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>96%,BRTitanium (IV) sulfate
前列腺成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL檸檬酸三丁酯(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRTributyl
HaCaT細(xì)胞,正常皮膚細(xì)胞 淋病柰瑟氏菌 小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達(dá));DG6-VAP33-GFP布地奈德-d8質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Budesonide-d8
PRAP1 Others Human PRAP1 / Proline-rich acidic 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) potewwiumBIcaonaTE碳酸氫鉀試劑級(jí)白色結(jié)晶粉末RTsigma
胚胎,皮膚,,肌肉;M-7米氏酮 Michler's ketone,98% 90-94-8 25G 通用試劑
大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞;RIN-m5F 原位胰腺腺癌細(xì)胞,,BxPC-3細(xì)胞 MM45T.Li細(xì)胞,鼠肝癌細(xì)胞系格拉司瓊相關(guān)物質(zhì)C Grcnisqtron Rqlctqd CoMpound C;N-[(1R,3r,5S)-9-czcbicyclo[3.3.1]non-3-yl]-1-Mqthyl-1H-indczolq-3-ccrboxcMidq xy7nochloridq 141136-01-8
T24, 膀胱癌細(xì)胞 HumanGumcopal硬樹脂5克BR,,99%
FCRL1 Others Human FCRL1 / IFGP1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 二;基二DietxylaMine;
鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原2免費(fèi)代測(cè)試劑盒說明ADIPOQ Protein Human 重組 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)細(xì)孔柱層析硅膠(20-60目,FCP Grade)Silica gel for column chromatography質(zhì)量規(guī)格:20-60目,層析用
胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5 QBC-939, 膽管癌細(xì)胞 Human細(xì)孔柱層析硅膠(100-200目,FCP Grade)Silica gel for column chromatography質(zhì)量規(guī)格:100-200目,層析用
小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞;MC3T3-E1細(xì)孔柱層析硅膠(300-400目,FCP Grade)Silica gel for column chromatography質(zhì)量規(guī)格:300-400目,層析用
SERPINC1 Others Cynomolgus 食蟹猴 SerpinC1 / AithrombinIII / ATIII 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 大孔柱層析硅膠(20-60目,FCP Grade)Silica gel for column chromatography質(zhì)量規(guī)格:20-60目,層析用
CNE-2Z 鼻咽癌母系細(xì)胞大孔柱層析硅膠(100-200目,FCP Grade)Silica gel for column chromatography質(zhì)量規(guī)格:100-200目,層析用
使用方法:
測(cè)定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶,。,酶是一種有機(jī)催化劑,,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系,。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外,。
7. 溫育:操作同3,。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。