凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I(ASK1)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品：尿苷胞苷激酶2(UCK2)重組蛋白 物種,； Homo sapiens (Human,，人) 來源； 原核表達(dá) 性狀：凍干粉 造血細(xì)胞激酶(HCK)重組蛋白 物種,； Homo sapiens (Human,，人) 來源； 原核表達(dá) 性狀：凍干粉 磷脂酰肌醇-4-激酶α(PI4Ka)重組蛋白 物種,； Homo sapiens (Human，人) 來源,； 原

相關(guān)產(chǎn)品：

蛋白激酶Cζ(PKCz)重組蛋白 物種,； Mus musculus (Mouse，小鼠) 來源,； 原核表達(dá) 性狀：凍干粉

凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I(ASK1)重組蛋白 物種,； Mus musculus (Mouse，小鼠) 來源,； 原核表達(dá) 性狀：凍干粉

單氨氧化酶A(MAOA)重組蛋白 物種,； Mus musculus (Mouse，小鼠) 來源,； 原核表達(dá) 性狀：凍干粉

僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Apoptosis Signal Regulating Kinase 1 (ASK1)

MAP3-K5; MAP3K5; ASK1; MAPKKK5; MEKK5; Mitogen-Activated Protein Kinase Kinase Kinase 5; MAPK/ERK kinase kinase 5

酶與激酶 細(xì)胞凋亡

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量：30.7kDa

實(shí)際分子量：31kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Leu693~Arg933 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：8.6

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

標(biāo)簽選擇：

親和標(biāo)簽：蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,；另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標(biāo)簽可分兩類：一類是短肽類標(biāo)簽；一類是長肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達(dá),。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析,。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,，大致步驟如下：

真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟：

a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞（常用的CHO和HEK293）

b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

e.      表達(dá)小試，條件優(yōu)化

f.       表達(dá)分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）

g.      大量表達(dá)

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟：

a.      選擇表達(dá)載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

e.      蛋白表達(dá)小試分析

f.       如果蛋白可溶,，蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,，則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定,，包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白,；表達(dá)蛋白的分析、純化,、檢測

　　誘導(dǎo)表達(dá)成功后,，表達(dá)蛋白的分析、純化,、檢測應(yīng)該順當(dāng),，按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題。

操作步驟 ：

根據(jù)使用量,，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?；靹騻溆茫?span>PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加）,。

1、樣品前處理：

a)對(duì)于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液,，用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下,，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。

b)對(duì)于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞,，用手指把細(xì)胞用力彈散,。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞,。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀,。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,，然后再裂解,。

c)對(duì)于組織樣品： 切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,，直至充分裂解,。

2、后處理：

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,，取上清,，即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作,。

諾氏梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Clostridium novyiPCR

皰疹病毒PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; B Virus(BV)BPCR

皮欽德病毒PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Pichinde virus(PARV)RTPCR

破傷風(fēng)梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Clostridium tetaniPCR

大鼠神經(jīng)纖維網(wǎng)蛋白1(P1)ELISA試劑盒 ，英文名： P1 ELISA Kit

Mouse cyclin D3 (Cyclin-D3) ELISA Kit 小鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒

Rat25-DihydroxyvitaminD3,HVD3ELISAKit 大鼠25羥D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHBeAg(立可讀)乙型肝炎e抗原規(guī)格：48T/96T

細(xì)胞半胱(cysteine)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次

Reatserine/threonineproteinkinase,STKELISAKit大鼠絲/蛋酸酶(STK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I(ASK1)重組蛋白呂氏泰勒蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Theileria lowenshuniPCR

綠膿假單胞菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Pseudomonas aeruginosaPCR

麻風(fēng)分枝桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Mycobacterium lepraePCR

馬巴貝斯蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Babesia equiPCR

注意事項(xiàng)：  

1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間。

2,、雖然作用溫和,，但能硬化組織，固定時(shí)間過久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,，切片時(shí)易碎,。因此固定時(shí)間通常不宜超過 24 小時(shí)。

3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,，使之不能充分暴露,，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果,。因此,，4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時(shí)，有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),，然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作,。

4,、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,，操作時(shí)請(qǐng)小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。

5,、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作