NADH脫氫酶1(ND1)重組蛋白的相關產品：G蛋白偶聯(lián)受體激酶6(GRK6)重組蛋白 物種,； Homo sapiens (Human,，人) 來源,； 原核表達 性狀：凍干粉 G蛋白偶聯(lián)受體激酶4(GRK4)重組蛋白 物種,； Homo sapiens (Human,，人) 來源； 原核表達 性狀：凍干粉 前列腺特異性膜抗原(PMSA)重組蛋白 物種,； Homo sapiens (Human,，人) 來源

僅供科研實驗產品屬性：

英文名稱：Recombinant NADH Dehydrogenase 1 (ND1)

MT-ND1; MTND1; NAD1; NADH-ubiquinone oxidoreductase chain 1; Mitochondrially Encoded NADH Dehydrogenase 1

酶與激酶

物種：Mus musculus (Mouse,，小鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：線粒體

預測分子量：37.4kDa

實際分子量：35kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Ala122~His171 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：6.2

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

標簽選擇：

親和標簽：蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,；另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標簽可分兩類：一類是短肽類標簽；一類是長肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達,。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析,。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的，大致步驟如下：

真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體和宿主細胞（常用的CHO和HEK293）

b.      表達載體的構建

c.      無內毒素的質粒抽提

d.      細胞瞬時轉染

e.      表達小試,，條件優(yōu)化

f.       表達分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）

g.      大量表達

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉化表達菌株

e.      蛋白表達小試分析

f.       如果蛋白可溶,，蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶，則需要變復性來制備可溶蛋白,。

h.      鑒定,，包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白；表達蛋白的分析,、純化,、檢測

　　誘導表達成功后，表達蛋白的分析,、純化,、檢測應該順當，按一般的實驗步驟做沒太大的問題,。

注意事項：  

1,、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間,。

2,、雖然作用溫和，但能硬化組織,，固定時間過久會導致組織變脆,，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時,。

3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色,，影響免疫組化結果,。因此,，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,，有時需要對抗原先進行修復，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作,。

4,、本產品對人體有害,，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內,。

5,、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作

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操作步驟 ：

根據(jù)使用量,，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?；靹騻溆茫?span>PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加）,。

1、樣品前處理：

a)對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液,，用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下,，使裂解液和細胞充分接觸。

b)對于懸浮細胞：離心收集細胞,，用手指把細胞用力彈散,。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細胞,。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀,。如果細胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細胞/管,，然后再裂解,。

c)對于組織樣品： 切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,，直至充分裂解,。

2、后處理：

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,，取上清,，即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作,。

毛霉屬通用PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Mucor spp.PCR

梅恩君病毒PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Main Drain Virus（MDV）RTPCR

孟氏尖旋線蟲PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Oxyspirura mansoniPCR

蜜蜂微孢子蟲通用PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Nosema spp.PCR

大鼠腎損傷分子1(Kim1)ELISA試劑盒 ，英文名： Kim1 ELISA Kit

Mouse motilin (MTL) ELISA Kit 小鼠胃動素(MTL)ELISA試劑盒

RatVitaminD3,VD3ELISAKit 大鼠D3(VD3)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHBXIP(HumanhepatitisBvirusXieractingprotein)ELISAKit人乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白規(guī)格：48T/96T

細胞ZAP70活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

swinemajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/SLAⅢELISAKit豬主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/SLAⅢ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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淋巴細胞性脈絡叢腦膜炎病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Lymphocytic Choriomeningitis  Virus(LCMV)RTPCR

淋病奈瑟菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Neisseria gonorrhoeaePCR

流產布魯氏菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Brucella abortusPCR