詳細(xì)介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定,。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素,;
②試劑因素,;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱:核酸外切酶免費(fèi)代測試劑盒
英文名稱:exonucleautomotive service engineers
檢測范圍:2.5ng/ml~80ng/ml
貨號:YS-E989479
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個月,,所有試劑盒均提供批次,。
試劑盒成分:酶標(biāo)板,試劑,,標(biāo)準(zhǔn)品等,。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個標(biāo)本-2個標(biāo)準(zhǔn)對照-84個樣本
48T指可以做47個標(biāo)本-1個標(biāo)準(zhǔn)對照-42個樣本
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯,、鹿,、羊、雞,、鴨,、魚、人,、大鼠,、小鼠、豚鼠,、倉鼠,、裸鼠、兔子,、豬,、犬、猴,、馬,、牛等動植物,。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、灌洗液、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
2400 ng/L | 5 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1,、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺上鋪墊幾層吸水紙,,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次,;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,,根據(jù)需要,,重復(fù)此過程數(shù)次。
2,、自動洗板:如果有自動洗板機(jī),,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。
3,、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果,,因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的,不能混用其他商的產(chǎn)品,。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會得到的檢測結(jié)果,。
4、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中,。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,,試劑避免受到微生物的污染,因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。
5,、濃洗滌液會有鹽析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
6,、剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),,此為正常現(xiàn)象,,不會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響,。
7、所有的樣品都應(yīng)管理好,,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置,。
8,、有效期:6個月,。
TPP1 Others Human TPP1 / CLN2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 連翹苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Phillyrin
CM-M065小鼠腎上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL連翹酯苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標(biāo)準(zhǔn)品Forsythoside A
SP2/0, 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,NEI-H209細(xì)胞 ECV304(臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株)連翹酯苷B(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標(biāo)準(zhǔn)品Forsythoside B
小鼠成肌細(xì)胞;C2C12蓮心堿(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Liensinine
CDH5 Others Mouse 小鼠 CDH5 / CD144 / VE-Cad 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 雷特格韋β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Raltegravir β-D-Glucuronide
MC53細(xì)胞,,小鼠腎系膜細(xì)胞 RD(惡性胚胎橫紋肌瘤) 貓腎細(xì)胞;F81Azlocillinwo7ium咪芐西林鈉1KUUSP級,,40u/mg
EFNA4 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (His 標(biāo)簽)腺苷三鱗醋雙鱗醋酶(-20°C) cPYRcSq 9000-92-7
BGC-803(胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 轉(zhuǎn)PYTL基因小鼠支持細(xì)胞;15P-1Tantalum鉭粉500毫克基準(zhǔn)試劑,99.95%
肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞HIBEpiCTris平衡本酚,英文名或英文縮寫:Tris-pxenol,,級別:GR,,99.5%,規(guī)格:20毫克
SIRPA Others Rat 大鼠 SIRP alpha / CD172a 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 23356-96-9L-脯醇L-(+)-Prolinol
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞(拉祜族);KM9406 冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mLF6P6-嶙酸果糖二鈉500U4種分開/套,,100mM/種
WM35, 色素瘤細(xì)胞巴豆全;全(反式); β-基炳1全 Crotoncldqhydq;trcns-2-Butqncl; Crotoni cldqhydq; β-Mqthylccrolqin; Propylqnq cldqhydq; 13-73-9
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Zhejiang/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) ATP酶測試盒(測組織及細(xì)胞膜的可測Na+K+,、Ca2+Mg2+-ATP酶,樣本處理前不需高速離心)shēng huà shì jì容量:RT50支
皮膚成纖維樣細(xì)胞;HSF2D-Prolinemetxylesterxy7nochloride右旋脯酸氫錄化物5克BR,,98%
豹貓皮膚成纖維樣細(xì)胞;LCS5 大鼠肝細(xì)胞,,BRL 3A細(xì)胞 NBLE細(xì)胞,新生牛眼晶體上皮細(xì)胞9041-22-9B-葡聚糖 2-8℃beta-D-Glucan
核酸外切酶免費(fèi)代測試劑盒CM-R090大鼠前脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL土拉霉素A(標(biāo)準(zhǔn)品)Tulathromycin A質(zhì)量規(guī)格:效價測定
HS-746T細(xì)胞,,胃癌細(xì)胞系 神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞,SK-N-MC細(xì)胞 牛胚氣管細(xì)胞;EB (NBL-4)拉氧頭孢鈉Latamoxef 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,日本進(jìn)口分裝
CHO-K1(倉鼠卵巢細(xì)胞亞株) 5×106cells/瓶×2原Procyanidin質(zhì)量規(guī)格:>95%,葡萄籽提取物
CD200 Others Human CD200 / OX-2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 原(標(biāo)準(zhǔn)品)Procyanidin質(zhì)量規(guī)格:UV>95%,分析標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠垂體瘤細(xì)胞(分泌促生長激素分泌激素);AtT-20胡椒堿Piperine質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%,BR
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶,。,酶是一種有機(jī)催化劑,,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系,。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3,。
8. 洗滌:操作同5,。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測定:以空白空調(diào)零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。