產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 說(shuō)明書(shū) |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 科研 |
英文名稱 | Recombinant Cystathionine (CTH) | 物種 | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
來(lái)源 | 原核表達(dá) | 應(yīng)用 | Cell culture; Activity Assa |
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上海研生實(shí)業(yè)有限公司 |
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更新時(shí)間:2023-03-30 15:28:25瀏覽次數(shù):408
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 說(shuō)明書(shū) |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 科研 |
英文名稱 | Recombinant Cystathionine (CTH) | 物種 | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
來(lái)源 | 原核表達(dá) | 應(yīng)用 | Cell culture; Activity Assa |
僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 性狀 | 來(lái)源 |
細(xì)胞胱硫醚γ裂解酶(CTH)重組蛋白 | Mus musculus (Mouse,,小鼠) | 凍干粉 | 原核表達(dá) |
英文名稱:Recombinant Cystathionine (CTH)
CSE; Cystathionase; Cysteine-protein sulfhydrase; Gamma-cystathionase
酶與激酶 代謝通路 心腦血管
物種:Mus musculus (Mouse,,小鼠)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::細(xì)胞質(zhì)
預(yù)測(cè)分子量:26.7kDa
實(shí)際分子量:27kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))
片段與標(biāo)簽:Phe14~Val224 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點(diǎn):8.2
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg
標(biāo)簽選擇:
親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過(guò)程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過(guò)程變得更加容易;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽,;一類是長(zhǎng)肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來(lái)分析,。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:
真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達(dá)載體的構(gòu)建
c. 無(wú)內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
e. 表達(dá)小試,條件優(yōu)化
f. 表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達(dá)
h. 親和純化
i. 檢測(cè)和鑒定
原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株
e. 蛋白表達(dá)小試分析
f. 如果蛋白可溶,,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,,則需要變復(fù)性來(lái)制備可溶蛋白。
h. 鑒定,,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白,;表達(dá)蛋白的分析、純化,、檢測(cè)
誘導(dǎo)表達(dá)成功后,,表達(dá)蛋白的分析、純化,、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng),,按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒(méi)太大的問(wèn)題。
注意事項(xiàng):
1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來(lái)調(diào)整固定時(shí)間。
2,、雖然作用溫和,,但能硬化組織,固定時(shí)間過(guò)久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,,切片時(shí)易碎,。因此固定時(shí)間通常不宜超過(guò) 24 小時(shí),。
3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果,。因此,,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí),有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),,然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作,。
4、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,,操作時(shí)請(qǐng)小心,,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5,、為了您的安全和健康,,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作
相關(guān)產(chǎn)品:
端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(TERT)重組蛋白 物種; Mus musculus (Mouse,,小鼠) 來(lái)源,; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉
蛋白二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)重組蛋白 物種; Rattus norvegicus (Rat,,大鼠) 來(lái)源,; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉
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操作步驟 :
根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加),。
1,、樣品前處理:
a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS,、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細(xì)胞充分接觸,。
b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散,。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀,。如果細(xì)胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管,,然后再裂解。
c)對(duì)于組織樣品: 切成細(xì)小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當(dāng)減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解,。
2,、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定,、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作,。
鼠疫耶爾森菌鼠疫桿菌PCR檢測(cè)試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Yersinia pestis()PCR
水牛正痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Buffalo Pox Virus(BPXV)PCR
絲狀網(wǎng)尾線蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Dictyocaulus filariaPCR
斯氏毛滴蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Trichomonas stableriPCR
大鼠葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(GL3)ELISA試劑盒 ,,英文名: GL3 ELISA Kit
Mouse heme oxygenase 1 (HO-1) ELISA Kit 小鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒
Ratlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit 大鼠脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGP-MM(MouseGlycogenphosphorylaseMM)ELISAKit小鼠糖原0酸化酶同工酶MM規(guī)格:48T/96T
細(xì)胞蛋酸酶2A(PP2A)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次(10個(gè)樣本)
RatToll-likereceptor9,TLR-9ELISAKit大鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細(xì)胞胱硫醚γ裂解酶(CTH)重組蛋白馬胃葡萄球菌PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Staphylococcus equorumPCR
馬腺病毒PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Equine Adenovirus(EAdV)PCR
馬隱秘桿菌PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Arcanobacterium equiPCR
瑪爾摩分枝桿菌PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Mycobacterium malmoenesPCR