詳細(xì)介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果,。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素,;
②試劑因素;
③操作因素,。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù),!
產(chǎn)品名稱:尿激肽原1免費(fèi)代測試劑盒說明
英文名稱:urinary kallikein 1
檢測范圍:0.25ng/mL~8ng/mL
貨號:YS-E989269
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個月,,所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分:酶標(biāo)板,試劑,,標(biāo)準(zhǔn)品等,。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個標(biāo)本-2個標(biāo)準(zhǔn)對照-84個樣本
48T指可以做47個標(biāo)本-1個標(biāo)準(zhǔn)對照-42個樣本
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯,、鹿,、羊、雞,、鴨,、魚、人,、大鼠,、小鼠、豚鼠,、倉鼠,、裸鼠、兔子,、豬,、犬、猴,、馬,、牛等動植物。
檢測目的:用于測定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、灌洗液,、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,,可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
2400 ng/L | 5 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實驗注意事項:
1、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),,浸泡1-2分鐘,,根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次,。
2,、自動洗板:如果有自動洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中,。
3,、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果,因為所有試劑都是有關(guān)聯(lián)的,,不能混用其他商的產(chǎn)品,。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會得到的檢測結(jié)果。
4,、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中,。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,,因為蛋白水解酶的干擾將導(dǎo)致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果,。
5、濃洗滌液會有鹽析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,。
6、剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),,此為正?,F(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響,。
7,、所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置,。
8,、有效期:6個月。
LLC-MK2 恒河猴腎細(xì)胞鈀粉(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRPalladium, powder
CM-H027成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL乙酸副品紅(>85%,BS)質(zhì)量規(guī)格:>85%,BSPararosaniline acetate
SKOV3/Taxol-25, 卵巢癌紫杉醇耐藥細(xì)胞株鈣激活鉀通道阻斷劑來源于覃青霉質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC Paxilline*, from Penicillium paxilli
骨肉瘤細(xì)胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS] 大鼠肺血管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL青霉酸(>98% (HPLC),BC)質(zhì)量規(guī)格:>98% (HPLC),BCPenicillic acid
內(nèi)膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)奧昔康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定Oxiconazole Nitrate
胰腺癌細(xì)胞;AsPC-1甲基-α-D-半乳糖苷100克
VSIG4 Others Mouse 小鼠 VSIG4 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 流吩嗪(-20℃) 5-Mqthylphqnczinium mqthosulfctq 1999/11/6
胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17IMIDAZOLECHROMA.BUFFER,5X,PH7.0咪唑?qū)游鼍彌_液蛋白組學(xué)級100MLCOLD
AGT Others Mouse 小鼠 AGT / SerpinA8 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 三乙酸100毫克保存:-20℃
NCI-H1975 肺腺癌細(xì)胞(化)
PCSK9 Others Human PCSK9 / NARC1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) xy7noinoneone氫醌50克ACS,,99%
CM-R116大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL魚藤酮 Rotenone,≥95% 83-79-4 1G 通用試劑
HA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 拂輕縮 Flurcndrqnolidq 124-88-2
小鼠腎成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL加拿大樹香脂,,英文名或英文縮寫:Canada balsam,級別:高,,98%,,規(guī)格:1克
P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]小鼠骨髓瘤細(xì)胞 P3/NSI/1-Ag4-1 mouse myeloma cell line [NS-1] DMEM培養(yǎng)基+10%FBS硅酮 OV-101SILICONE OV-101
尿激肽原1免費(fèi)代測試劑盒說明草魚腎細(xì)胞;GIK檸檬苦素,,黃柏內(nèi)酯(橙皮提取) Limonin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,橙皮提取
615小鼠滑膜肉瘤瘤株;ZM755 小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL硬脂酸(50%)Stearic acid質(zhì)量規(guī)格:含量50%,藥用級
mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞 Mouse硬脂酸(98%)Stearic acid質(zhì)量規(guī)格:含量98%,藥用級
EPCAM Others Mouse 小鼠 EpCAM / OP1 / CD326 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 牛蒡苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)Arctigenin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標(biāo)準(zhǔn)品
正常上皮細(xì)胞;MCF 10A牛蒡子苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Arctiin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標(biāo)準(zhǔn)品
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。,,酶是一種有機(jī)催化劑,,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象,。因此該體系常被稱為酶放大體系,。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋,。 24μg/ml 5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù)5次,,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,,空白孔除外,。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5,。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。