腺苷酸激酶2(AK2)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品：肝素酶(HPSE)活性蛋白 物種,； Homo sapiens (Human,，人) 來源,； 原核表達 性狀：凍干粉 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶2(ECE2)重組蛋白 物種,； Homo sapiens (Human,，人) 來源； 原核表達 性狀：凍干粉 拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ(1)重組蛋白 物種,； Mus musculus (Mouse,，小鼠) 來源； 原核表達 性狀：凍干粉

僅供科研實驗產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Adenylate Kinase 2 (AK2)

ADK2; Adenylate monophosphate kinase; ATP-AMP transphosphorylase 2; AMP phosphotransferase

酶與激酶 代謝通路 細胞凋亡

物種：Rattus norvegicus (Rat,，大鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：n/a

預(yù)測分子量：22.8kDa

實際分子量：-(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Leu64~Ser232 with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

標(biāo)簽選擇：

親和標(biāo)簽：蛋白重組表達過程中采用親和標(biāo)簽融合表達有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,；另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標(biāo)簽可分兩類：一類是短肽類標(biāo)簽；一類是長肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析,。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,，大致步驟如下：

真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體和宿主細胞（常用的CHO和HEK293）

b.      表達載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細胞瞬時轉(zhuǎn)染

e.      表達小試，條件優(yōu)化

f.       表達分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）

g.      大量表達

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達菌株

e.      蛋白表達小試分析

f.       如果蛋白可溶,，蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,，則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定,，包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白,；表達蛋白的分析、純化,、檢測

　　誘導(dǎo)表達成功后,，表達蛋白的分析、純化,、檢測應(yīng)該順當(dāng),，按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

注意事項：  

1,、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2,、雖然作用溫和,，但能硬化組織，固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,，切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,，使之不能充分暴露,，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果,。因此,，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復(fù),，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作,。

4、本產(chǎn)品對人體有害,，操作時請小心,，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作

相關(guān)產(chǎn)品：

p21蛋白激活激酶1(PAK1)重組蛋白 物種,； Homo sapiens (Human，人) 來源,； 原核表達 性狀：凍干粉

腺苷酸環(huán)化酶4(ADCY4)重組蛋白 物種,； Mus musculus (Mouse，小鼠) 來源,； 原核表達 性狀：凍干粉

蛋白激酶Cι(PKCi)重組蛋白 物種,； Homo sapiens (Human，人) 來源,； 原核表達 性狀：凍干粉

操作步驟 ：

根據(jù)使用量,，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,。混勻備用（PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加）,。

1,、樣品前處理：

a)對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,，使裂解液和細胞充分接觸,。

b)對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散,。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,，再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀,。如果細胞量較多,，必需分裝成 50-100 萬細胞/管，然后再裂解,。

c)對于組織樣品： 切成細小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,，如果需要高濃度的蛋白樣品,，可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,，直至充分裂解,。

2、后處理：

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清,，即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作,。

登革病毒通用PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Dengue Virus(DENV)RTPCR

脆弱擬桿菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Bacteroides fragilisPCR

腸炎沙門氏菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Salmonella enteritidisPCR

產(chǎn)堿普羅威登斯菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Providencia alcalifaciensPCR

VEGFR-3/FLt-4 血管內(nèi)皮細胞生長因子受體-3(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-Phospho-Caspase-9 (Thr125) 0酸化半胱9抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh PCGF3/RNF3 環(huán)指蛋白3抗體 規(guī)格 0.2ml

CEACAM1 Kit Human 人 CEACAM1 / CD66a ELISA配對抗體 ELISA

TUSC2 英文名稱： 血小板源性生長因子A相關(guān)蛋白2抗體 0.2ml

CLEC5A 英文名稱： C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族5成員A抗體 0.2ml

Anti-Phospho-Caspase-9 (Thr125) 0酸化半胱9抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

腺苷酸激酶2(AK2)重組蛋白分枝桿菌屬通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Mycobacterium spp.PCR

封閉毛細線蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Capillaria obsignataPCR

弗格森埃立克體PCR檢測試劑盒 英文名稱; Ehrlichia fergusoniiPCR

福賽斯坦納菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Tannerella forsythiaPCR