產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 說明書 |
---|---|---|---|
應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 科研實驗 |
英文名稱 | Recombinant Rho Family GTPase 1 (RND1) | 物種 | Homo sapiens (Human,,人) |
來源 | 原核表達 | 應(yīng)用 | Cell culture; Activity Assa |
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上海研生實業(yè)有限公司 |
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15201736385 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-03-31 13:30:13瀏覽次數(shù):426
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 說明書 |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 科研實驗 |
英文名稱 | Recombinant Rho Family GTPase 1 (RND1) | 物種 | Homo sapiens (Human,,人) |
來源 | 原核表達 | 應(yīng)用 | Cell culture; Activity Assa |
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轉(zhuǎn)酮醇酶(TKT)重組蛋白 物種; Rattus norvegicus (Rat,,大鼠) 來源,; 原核表達 性狀:凍干粉
僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 性狀 | 來源 |
Rho家族GTP酶1(RND1)重組蛋白 | Homo sapiens (Human,人) | 凍干粉 | 原核表達 |
英文名稱:Recombinant Rho Family GTPase 1 (RND1)
ARHS; RHO6; RHOS; Ras Homolog Gene Family Member S; Rho-related GTP-binding protein Rho6
酶與激酶 代謝通路 發(fā)育科學(xué)
物種:Homo sapiens (Human,,人)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::n/a
預(yù)測分子量:29.4kDa
實際分子量:-(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Met1~Cys229 with
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點:-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg
標(biāo)簽選擇:
親和標(biāo)簽:蛋白重組表達過程中采用親和標(biāo)簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽,;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析,。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:
真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細胞瞬時轉(zhuǎn)染
e. 表達小試,條件優(yōu)化
f. 表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達菌株
e. 蛋白表達小試分析
f. 如果蛋白可溶,,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。
h. 鑒定,,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白,;表達蛋白的分析、純化,、檢測
誘導(dǎo)表達成功后,,表達蛋白的分析、純化,、檢測應(yīng)該順當(dāng),,按一般的實驗步驟做沒太大的問題。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加),。
1,、樣品前處理:
a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細胞充分接觸,。
b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散,。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀,。如果細胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,然后再裂解,。
c)對于組織樣品: 切成細小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,,直至充分裂解,。
2、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,,取上清,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作。
胎兒滴蟲PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Trichomonas foetusPCR
梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Clostridium estertheticum PCR
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斯氏分枝桿菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Mycobacterium szulgaiPCR
UTS2R/GPR14(Urotensin II receptor:G Protein Coupled Receptor 14) G蛋白偶聯(lián)受體14抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
PLAUR PLAUR / CD87 / uPAR 鼠單抗 (PE) Human
Rhesus antibody Rh phospho-CSF1R(Tyr923) 0酸化巨噬細胞集落刺激因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml
考馬斯亮藍R-250蛋白快速染色液 250ml 自產(chǎn)
ZNF347 英文名稱: 鋅指蛋白347抗體 0.2ml
DAT1 英文名稱: 神經(jīng)細胞特異性轉(zhuǎn)錄因子DAT1抗體 0.2ml
PLAUR PLAUR / CD87 / uPAR 鼠單抗 (PE) Human
Rho家族GTP酶1(RND1)重組蛋白輪狀病毒群PCR檢測試劑盒 英文名稱; Rotavirus A ARTPCR
羅斯河病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Ross River Virus(RRV)RTPCR
通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Borrelia spp.PCR
綠膿假單胞菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Pseudomonas aeruginosaPCR
注意事項:
1,、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。
2,、雖然作用溫和,,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,,切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時,。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結(jié)果。因此,,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,,有時需要對抗原先進行修復(fù),然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作,。
4,、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。
5、為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作