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羰基還原酶1(CBR1)重組蛋白

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更新時間:2023-03-31 13:23:55瀏覽次數(shù):424

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 說明書
應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 科研實驗
英文名稱 Recombinant Carbonyl Reductase 1 (CBR1) 物種 Mus musculus (Mouse,小鼠)
來源 原核表達 應(yīng)用 Cell culture; Activity Assa
羰基還原酶1(CBR1)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:谷氧還蛋白3(GLRX3)重組蛋白 物種,; Mus musculus (Mouse,,小鼠) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉 肉毒堿-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(CORT)重組蛋白 物種,; Homo sapiens (Human,,人) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉 絲裂原激活蛋白激酶7(MAPK7)重組蛋白 物種,; Mus musculus (Mouse,,小鼠) 來

詳細介紹

標簽選擇:

親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽,;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析,。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:

真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

a.      選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHOHEK293

b.      表達載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細胞瞬時轉(zhuǎn)染

e.      表達小試,條件優(yōu)化

f.       表達分析和鑒定(SDS-PGAEWB

g.      大量表達

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

性狀

來源

羰基還原酶1(CBR1)重組蛋白

Mus musculus (Mouse,,小鼠)

凍干粉

原核表達

英文名稱:Recombinant Carbonyl Reductase 1 (CBR1)

CBR; SDR21C1; CRN; Short Chain Dehydrogenase/Reductase Family 21C,Member 1; 15-hydroxyprostaglandin dehydrogenase [NADP(+)]; Prostaglandin 9-ketoreductase

酶與激酶 代謝通路 營養(yǎng)代謝

物種:Mus musculus (Mouse,,小鼠)

來源:原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位::n/a

預(yù)測分子量:26.6kDa

實際分子量:-(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽:Asn66~Asp271 with

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% TrehaloseProclin300.

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點:-

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

相關(guān)產(chǎn)品:

脂蛋白脂酶(LPL)重組蛋白 物種,; Homo sapiens (Human,,人) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉

蛋白激酶Cε(PKCe)重組蛋白 物種,; Rattus norvegicus (Rat,,大鼠) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉

白激酶Cδ(PKCd)重組蛋白 物種,; Mus musculus (Mouse,,小鼠) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉

1.png

原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

a.      選擇表達載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達菌株

e.      蛋白表達小試分析

f.       如果蛋白可溶,,蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定,,包括SDS-PAGEWB鑒定

GZMH蛋白,;表達蛋白的分析,、純化,、檢測

  誘導(dǎo)表達成功后,,表達蛋白的分析、純化,、檢測應(yīng)該順當,,按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

操作步驟 :

根據(jù)使用量,,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫?span>PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加),。

1、樣品前處理:

a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,,用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細胞充分接觸。

b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,,用手指把細胞用力彈散,。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞,。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀,。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,,然后再裂解,。

c)對于組織樣品: 切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,,直至充分裂解。

2,、后處理:

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,,取上清,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作,。

野牛奧斯特線蟲PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Ostertagia bisonisPCR

洋蔥伯克氏菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Burkholderia cepaciaPCR

羊口瘡病毒PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Orf Virus(ORFV)PCR

羊巴貝斯蟲PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Babesia ovisPCR

VEGF 血管內(nèi)皮生長因子(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

Anti-Caspase-6 (NT) 半胱胺酸蛋白-6抗體(N)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh PCK2 0酸羧化酶2抗體 規(guī)格 0.2ml

TIMP1 Kit Human TIMP1 / EPA / CLGI ELISA配對抗體 ELISA

TACC1 英文名稱: 癌、胃癌抗原GA55抗體 0.2ml

C21orf88 英文名稱: 21號染色體開放閱讀框88抗體 0.2ml

Anti-Caspase-6 (NT) 半胱胺酸蛋白-6抗體(N)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

羰基還原酶1(CBR1)重組蛋白即森林腦炎病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Forest Encephalitis Virus(SFV)RTPCR

擠奶工結(jié)節(jié)病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Milker's Nodule Virus(MNV)PCR

寄生水霉PCR檢測試劑盒 英文名稱; Saprolegnia parasiticaPCR

莢膜組織胞漿菌馬皮疽變種PCR檢測試劑盒 英文名稱; Histoplasma capsulatum var. farciminosumPCR

注意事項:  

1,、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,,應(yīng)當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2,、雖然作用溫和,,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,,切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果,。因此,,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復(fù),,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作,。

4、本產(chǎn)品對人體有害,,操作時請小心,,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5,、為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作


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