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谷氨酰脯氨酰tRNA合成酶(EPRS)重組蛋白

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更新時(shí)間:2023-03-31 14:40:29瀏覽次數(shù):333

聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 詳見說明書
應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 科研
英文名稱 Recombinant Glutamyl Prolyl tRNA Synthetase ( 應(yīng)用 物種 Homo sapiens (Human,人)
來源 原核表達(dá) 應(yīng)用 Cell culture; Activity Assa
谷氨酰脯氨酰tRNA合成酶(EPRS)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:類固醇5α還原酶1(SRD5a1)重組蛋白 物種,; Mus musculus (Mouse,,小鼠) 來源; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉 組蛋白脫乙?;?(HDAC1)重組蛋白 物種,; Mus musculus (Mouse,小鼠) 來源,; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉 亮氨酰tRNA合成酶(LARS)重組蛋白 物種,; Homo sapiens (H

詳細(xì)介紹

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僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

性狀

來源

谷氨酰脯氨酰tRNA合成酶(EPRS)重組蛋白

Homo sapiens (Human,人)

凍干粉

原核表達(dá)

英文名稱:Recombinant Glutamyl Prolyl tRNA Synthetase (EPRS)

PARS; EARS; PIG32; QPRS; QARS; Bifunctional Aminoacyl-TRNA Synthetase; Glutamate tRNA Ligase; Proline tRNA Ligase; Cell proliferation-inducing gene 32 protein

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量:26.4kDa

實(shí)際分子量:26kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Asp749~Thr956 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% TrehaloseProclin300

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點(diǎn):8.7

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

1.png

標(biāo)簽選擇:

親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽,;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá),。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析,。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHOHEK293

b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

e.      表達(dá)小試,,條件優(yōu)化

f.       表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAEWB

g.      大量表達(dá)

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

e.      蛋白表達(dá)小試分析

f.       如果蛋白可溶,,蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白,。

h.      鑒定,,包括SDS-PAGEWB鑒定

GZMH蛋白;表達(dá)蛋白的分析,、純化,、檢測

  誘導(dǎo)表達(dá)成功后,表達(dá)蛋白的分析,、純化、檢測應(yīng)該順當(dāng),,按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題,。

操作步驟 :

根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF zui終濃度為 1mM,。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加),。

1,、樣品前處理:

a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細(xì)胞充分接觸,。

b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散,。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀,。如果細(xì)胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,然后再裂解,。

c)對(duì)于組織樣品: 切成細(xì)小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當(dāng)減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解,。

2,、后處理:

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGEWestern blotting 和免疫沉淀等操作,。

古柏線蟲通用PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Cooperia spp.PCR

鴿皰疹病毒型PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Columbid Herpes Virus 1CHV11PCR

戈氏放線菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Actinomyces gerencseriaePCR

剛果嗜皮菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Dermatophilus congolensisPCR

TRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2) 壞死因子受體相關(guān)因子2抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5ml

Anti-CaMK2a /鈣調(diào)素依賴蛋白2α抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh PDGF-A 血小板源性生長因子-A抗體 規(guī)格 0.1ml

Alpha-1-Antichymotrypsin抗胰糜 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝

TLR3 英文名稱: Toll樣受體3抗體 0.1ml

C5orf52 英文名稱: 5號(hào)染色體開放閱讀框52抗體 0.2ml

Anti-CaMK2a /鈣調(diào)素依賴蛋白2α抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

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小孢子菌屬通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Microsporum spp.PCR

小鼠肝炎病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Mouse Hepatitis Virus(MHV)RTPCR

小隱孢子蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Cryptosporidium parvumPCR

注意事項(xiàng):  

1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間,。

2,、雖然作用溫和,但能硬化組織,,固定時(shí)間過久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過 24 小時(shí),。

3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結(jié)果,。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時(shí),,有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),,然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

4,、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。

5,、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作


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