產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 詳見說明書 |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 科研 |
英文名稱 | Recombinant Glutamyl Prolyl tRNA Synthetase ( | 應(yīng)用 | 物種 Homo sapiens (Human,人) |
來源 | 原核表達(dá) | 應(yīng)用 | Cell culture; Activity Assa |
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上海研生實(shí)業(yè)有限公司 |
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15201736385 |
參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間:2023-03-31 14:40:29瀏覽次數(shù):333
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 詳見說明書 |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 科研 |
英文名稱 | Recombinant Glutamyl Prolyl tRNA Synthetase ( | 應(yīng)用 | 物種 Homo sapiens (Human,人) |
來源 | 原核表達(dá) | 應(yīng)用 | Cell culture; Activity Assa |
相關(guān)產(chǎn)品:
前列腺素E合酶(PTGES)重組蛋白 物種; Homo sapiens (Human,,人) 來源,; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉
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肽酶抑制因子16(PI16)重組蛋白 物種; Mus musculus (Mouse,,小鼠) 來源,; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉
僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 性狀 | 來源 |
谷氨酰脯氨酰tRNA合成酶(EPRS)重組蛋白 | Homo sapiens (Human,人) | 凍干粉 | 原核表達(dá) |
英文名稱:Recombinant Glutamyl Prolyl tRNA Synthetase (EPRS)
PARS; EARS; PIG32; QPRS; QARS; Bifunctional Aminoacyl-TRNA Synthetase; Glutamate tRNA Ligase; Proline tRNA Ligase; Cell proliferation-inducing gene 32 protein
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,,人)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::細(xì)胞質(zhì)
預(yù)測分子量:26.4kDa
實(shí)際分子量:26kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Asp749~Thr956 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點(diǎn):8.7
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg
標(biāo)簽選擇:
親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽,;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá),。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析,。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:
真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達(dá)載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
e. 表達(dá)小試,,條件優(yōu)化
f. 表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達(dá)
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株
e. 蛋白表達(dá)小試分析
f. 如果蛋白可溶,,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白,。
h. 鑒定,,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白;表達(dá)蛋白的分析,、純化,、檢測
誘導(dǎo)表達(dá)成功后,表達(dá)蛋白的分析,、純化、檢測應(yīng)該順當(dāng),,按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題,。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加),。
1,、樣品前處理:
a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細(xì)胞充分接觸,。
b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散,。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀,。如果細(xì)胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,然后再裂解,。
c)對(duì)于組織樣品: 切成細(xì)小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當(dāng)減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解,。
2,、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作,。
古柏線蟲通用PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Cooperia spp.PCR
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剛果嗜皮菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Dermatophilus congolensisPCR
TRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2) 壞死因子受體相關(guān)因子2抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5ml
Anti-CaMK2a 鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白2α抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
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C5orf52 英文名稱: 5號(hào)染色體開放閱讀框52抗體 0.2ml
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谷氨酰脯氨酰tRNA合成酶(EPRS)重組蛋白腺熱埃里希體PCR檢測試劑盒 英文名稱; Erlichia sennetsuPCR
小孢子菌屬通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Microsporum spp.PCR
小鼠肝炎病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Mouse Hepatitis Virus(MHV)RTPCR
小隱孢子蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Cryptosporidium parvumPCR
注意事項(xiàng):
1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間,。
2,、雖然作用溫和,但能硬化組織,,固定時(shí)間過久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過 24 小時(shí),。
3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結(jié)果,。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時(shí),,有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),,然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。
4,、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。
5,、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作