產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 詳見說明書 |
---|---|---|---|
應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 科研 |
英文名稱 | Recombinant Acid Phosphatase 6, Lysophosphati | 物種 | Homo sapiens (Human,,人) |
來源 | 原核表達(dá) | 應(yīng)用 | Cell culture; Activity Assa |
![]() |
上海研生實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-03-31 14:41:10瀏覽次數(shù):310
聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 詳見說明書 |
---|---|---|---|
應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 科研 |
英文名稱 | Recombinant Acid Phosphatase 6, Lysophosphati | 物種 | Homo sapiens (Human,,人) |
來源 | 原核表達(dá) | 應(yīng)用 | Cell culture; Activity Assa |
標(biāo)簽選擇:
親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá),。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析,。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:
真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達(dá)載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染
e. 表達(dá)小試,,條件優(yōu)化
f. 表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達(dá)
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 性狀 | 來源 |
血磷脂酸酸性磷酸酶(ACP6)重組蛋白 | Homo sapiens (Human,,人) | 凍干粉 | 原核表達(dá) |
英文名稱:Recombinant Acid Phosphatase 6, Lysophosphatidic (ACP6)
LPAP; ACPL1; PACPL1; Acid phosphatase-like protein 1; Lysophosphatidic acid phosphatase type 6
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測分子量:52.6kDa
實際分子量:-(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Met1~Glu428 with
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點:-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg
相關(guān)產(chǎn)品:
蛋白激酶Cβ1(PKCb1)重組蛋白 物種,; Oryctolagus cuniculus (Rabbit,兔) 來源,; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉
胎盤堿性磷酸酶樣蛋白2(ALPPL2)重組蛋白 物種,; Homo sapiens (Human,人) 來源,; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉
過氧化還原酶6(PRDX6)重組蛋白 物種,; Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 來源,; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉
原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株
e. 蛋白表達(dá)小試分析
f. 如果蛋白可溶,,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白,。
h. 鑒定,,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白;表達(dá)蛋白的分析,、純化,、檢測
誘導(dǎo)表達(dá)成功后,表達(dá)蛋白的分析,、純化,、檢測應(yīng)該順當(dāng),,按一般的實驗步驟做沒太大的問題。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫?span>PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加),。
1、樣品前處理:
a)對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,,用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。
b)對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,,用手指把細(xì)胞用力彈散,。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞,。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀,。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,,然后再裂解。
c)對于組織樣品: 切成細(xì)小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當(dāng)減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解,。
2,、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作,。
肝片吸蟲PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Fasciola hepaticaPCR
副溶血嗜血桿菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Haemophilus parahemolyticusPCR
副雞禽桿菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Avibacterium paragallinarumPCR
弗朗西斯菌通用PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Francisella spp.PCR
TRAF1 壞死因子受體相關(guān)因子1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Calmodulin/CAM 鈣調(diào)節(jié)素抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PDGF-B 血小板源性生長因子-B抗體 規(guī)格 0.1ml
Amyloid Beta 淀粉樣蛋白 濃縮液 0.1ml 進口分裝
TCRG 英文名稱: T細(xì)胞受體γ抗體 0.2ml
CCDC85B 英文名稱: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白85B抗體 0.2ml
Anti-Calmodulin/CAM 鈣調(diào)節(jié)素抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
血磷脂酸酸性磷酸酶(ACP6)重組蛋白新城疫病毒=禽副粘病毒型PCR檢測試劑盒 英文名稱; Newcastle Disease Virus(NDV)(=1)RTPCR
新生隱球菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Cryptococcus neoformansPCR
胸膜肺炎放線桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Actinobacillus pleuropneumoniaePCR
絮狀表皮癬菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Epidermophyton floccosumPCR
注意事項:
1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間,。
2,、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,,切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果,。因此,,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復(fù),,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作,。
4、本產(chǎn)品對人體有害,,操作時請小心,,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5,、為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作