詳細(xì)介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定,。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,,有時常見到一些錯誤的結(jié)果,。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素,;
②試劑因素,;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱:單純皰疹病毒Ⅰ+Ⅱ型IgM抗體免費代測試劑盒說明
英文名稱:Herpes simplex virus Ⅰ+Ⅱ IgM Antibody
檢測范圍:0~
貨號:YS-E989321
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個月,,所有試劑盒均提供批次,。
試劑盒成分:酶標(biāo)板,試劑,,標(biāo)準(zhǔn)品等,。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個標(biāo)本-2個標(biāo)準(zhǔn)對照-84個樣本
48T指可以做47個標(biāo)本-1個標(biāo)準(zhǔn)對照-42個樣本
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯,、鹿,、羊、雞,、鴨,、魚、人,、大鼠,、小鼠、豚鼠,、倉鼠,、裸鼠、兔子,、豬,、犬、猴,、馬,、牛等動植物。
檢測目的:用于測定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、灌洗液,、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗,。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
2400 ng/L | 5 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實驗注意事項:
1,、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次,;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,,根據(jù)需要,,重復(fù)此過程數(shù)次。
2,、自動洗板:如果有自動洗板機(jī),,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
3,、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果,,因為所有試劑都是有關(guān)聯(lián)的,不能混用其他商的產(chǎn)品,。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會得到的檢測結(jié)果,。
4、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中,。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,,試劑避免受到微生物的污染,因為蛋白水解酶的干擾將導(dǎo)致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果,。
5,、濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,。
6,、剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。
7,、所有的樣品都應(yīng)管理好,,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置,。
8、有效期:6個月,。
NCI-H358(非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SH-SY5Y(神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)L-正亮氨酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRL-Norleucine
CL-0359HLF-a(肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2Fmoc-D-4-苯丙氨酸質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%Fmoc-4-iodo-D-Phe-OH
CD28 Others Human CD28 / TP44 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3,5-二-L-酪氨酸質(zhì)量規(guī)格:BR,,98%3,5-Diiodo-L-tyrosine
腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞總RNAHRCEpiC NAL-脯氨酸甲酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BRL-Proline methyl ester
MDA-MB-468細(xì)胞,癌細(xì)胞 猴的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,MSCS細(xì)胞 HT-29, 結(jié)腸癌細(xì)胞L-絲氨酸甲酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRL-Serine methyl ester
小細(xì)胞肺癌;NCI-H2227依諾沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Enoxacin
CD3D & CD3E Others Mouse 小鼠 CD3D & CD3E Heterodimer 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) [Nle4,DPhe7] a-促激素酰胺; 美拉諾坦 I質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR[Nle4,DPhe7] a-MSH, amide; Melanotan I
COC1 卵巢癌細(xì)胞[Nle8’18,Tyr34]-甲狀旁腺激素(1-34) 酰胺 (牛)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR[Nle8’18,Tyr34]-pTH (1-34) amide (bovine)
AsPC-1轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞 AsPC-1 human metastatic pancreatic adenocarcinoma cells 1640+10% Hyclone滅活血清[Nle8’18,Tyr34]-甲狀旁腺激素(3-34) 酰胺(牛)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR[Nle8’18,Tyr34]-pTH (3-34) amide (bovine)
TNFSF11 Protein Human 重組 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)2-氨基咪唑鹽 質(zhì)量規(guī)格:>98%2-Aminoimidazole hemisulfate
CRL-2780細(xì)胞,,結(jié)腸癌細(xì)胞 骨髓瘤細(xì)胞,3T3D細(xì)胞 惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92 [NK92]乳酸脫氫酶(兔肌)5克
WB-F344(大鼠肝上皮樣干細(xì)胞) 5×106cells/瓶×26-溴乙酸 6-Bromohexanoic acid,97% 4224-70-8 5G 通用試劑
BMPR2 Others Human BMPR-II 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 雙(三基硅基)安 litxium bis(trimqthylsilyl)cmidq 4039/3/1
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KMY0919三扶乙醇,,英文名或英文縮寫:TFEA,級別:CP,,98%,規(guī)格:25克
臍帶靜脈平滑肌細(xì)胞 (HUVSMC)( 5×105 )NutrientBroth 100g/500g/北京250g BD 233000
單純皰疹病毒Ⅰ+Ⅱ型IgM抗體免費代測試劑盒說明少突膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基OM-prf芹糖甘草苷,;甘草苷元-7-O-D-芹糖-4’-O-D-葡萄糖苷Liquiritin apioside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標(biāo)準(zhǔn)品
PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 芹糖異甘草苷;異甘草苷芹糖Isoliquiritin apioside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標(biāo)準(zhǔn)品
Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293sars181A白屈菜紅堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Chelerythrine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標(biāo)準(zhǔn)品
CNE1-lmp\l細(xì)胞,轉(zhuǎn)基因鼻咽癌細(xì)胞系 小鼠色素瘤細(xì)胞,B16F1細(xì)胞 CM-H023甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mLTAE684NVP-TAE684質(zhì)量規(guī)格:>98%,選擇性的ALK抑制劑
NIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2青蒿酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Artemisic acid質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標(biāo)準(zhǔn)品
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶,。,酶是一種有機(jī)催化劑,,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系,。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù)5次,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3,。
8. 洗滌:操作同5,。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測定:以空白空調(diào)零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。