詳細(xì)介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果,。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素,;
②試劑因素;
③操作因素,。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作,,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù),!
產(chǎn)品名稱:巢蛋白免費(fèi)代測(cè)試劑盒
英文名稱:Nestin
檢測(cè)范圍:0.5ng/ml~16ng/ml
貨號(hào):YS-E989375
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個(gè)月,,所有試劑盒均提供批次,。
試劑盒成分:酶標(biāo)板,試劑,,標(biāo)準(zhǔn)品等,。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個(gè)標(biāo)本-2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-84個(gè)樣本
48T指可以做47個(gè)標(biāo)本-1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-42個(gè)樣本
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯,、鹿,、羊、雞,、鴨,、魚、人,、大鼠、小鼠,、豚鼠,、倉(cāng)鼠、裸鼠,、兔子,、豬、犬,、猴,、馬、牛等動(dòng)植物,。
檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、灌洗液,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說(shuō)明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個(gè) |
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,,因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L | 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1,、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次,;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,,根據(jù)需要,,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。
2,、自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。
3,、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測(cè)效果,,因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的,不能混用其他商的產(chǎn)品,。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說(shuō)明操作才會(huì)得到的檢測(cè)結(jié)果,。
4、在儲(chǔ)存及孵育過(guò)程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中,。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,,試劑避免受到微生物的污染,因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果,。
5,、濃洗滌液會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,。
6,、剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會(huì)有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
7,、所有的樣品都應(yīng)管理好,,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。
8,、有效期:6個(gè)月,。
PLC/PRF/5(肝癌亞力山大細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 293T/17 [HEK 293T/17] (胚腎細(xì)胞)Boc-L-beta-谷氨酸5-芐酯質(zhì)量規(guī)格:0.98Boc-L-ß-homoaspartic acid 5-benzyl ester
CL-0236U-2 OS(骨肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2Fmoc-L-β-谷氨酸5-叔丁基酯質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRFmoc-β-homoaspartic acid
IL1R1 Others Human IL1R1 / CD121a 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Fmoc-L-beta-高谷氨酸6-叔丁酯質(zhì)量規(guī)格:0.98Fmoc-L-β-Homoglutamic acid 6-tert-butyl ester
肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞cDNAHPAF cDNA高精氨酸質(zhì)量規(guī)格:98%,BR,,L型H-HomoArg-OH
HCC38細(xì)胞,,導(dǎo)管癌細(xì)胞 昆蟲細(xì)胞系,SF-9細(xì)胞 肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)BOC-D-纈氨酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRBoc-D-Val-OH
腎臟上皮細(xì)胞HREpiC4-羥基心得安β-D-葡萄糖苷酸 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口4-Hydroxy Propranolol β-D-Glucuronide
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/New York/18/2009) HA 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) S(-)-鹽酸心得安質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口S(-)-Propranolol • HCl
IEC-6 大鼠小腸引窩上皮細(xì)胞雷洛昔芬-d4質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Raloxifene-d4
CM-H115腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL雷洛昔芬6-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Raloxifene 6-Glucuronide
U266B1 [U266], 多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞(+)-兒茶素水合物質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,進(jìn)分(+)-Catechin hydrate
SK-HEL-1細(xì)胞,皮膚色素瘤細(xì)胞 鱗癌細(xì)胞(高分化),HCC 94細(xì)胞 支氣管上皮細(xì)胞總RNAHBEpiC NA二本胺磺酸鈉100毫克2~8℃
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1甘膽酸 Glycocholic acid hydrate, ≥97% 100MG 通用試劑
FGF9 Others Human FGF9 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) L-瓜安醋 L-Citrullinq 37-72-8
KM小鼠子瘤株;U14纖維素透析袋500U保存:-20℃
PROCR Others Mouse 小鼠 Epcr / PROCR 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 吧豆醛(劇毒)notonel7exy7e
巢蛋白免費(fèi)代測(cè)試劑盒輸尿管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)叔丁氧羰基-L-天冬氨酸-4-叔丁酯 Boc-Asp(OtBu)-OH質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
CREB3L1 Others Human CREB3L1 / OASIS (aa 396-519) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) BOC-D-脯氨酸Boc-D-Pro-OH質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
大鼠氣管上皮細(xì)胞;RTEBOC-L-絲氨酸甲酯Boc-Ser-OMe質(zhì)量規(guī)格:BR
PG49細(xì)胞,,肺腺癌細(xì)胞系 轉(zhuǎn)S9基因倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞,ZA1細(xì)胞 CL-0042BxPC-3(原位胰腺腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2N-BOC-O-芐基-L-絲氨酸N-BOC-O-Benzyl-L-serine質(zhì)量規(guī)格:0.98
SVEC4-10(小鼠結(jié)內(nèi)皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2BOC-L-蘇氨酸Boc-Thr-OH質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
使用方法:
測(cè)定法的靈敏度來(lái)自作為報(bào)告的酶,。,,酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象,。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋,。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測(cè)樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測(cè)樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動(dòng)混勻,。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外,。
7. 溫育:操作同3,。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值),。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。