ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外,，有時常見到一些錯誤的結(jié)果,。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素,；
③操作因素,。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù),！
產(chǎn)品名稱：巢蛋白免費(fèi)代測試劑盒
英文名稱：Nestin
檢測范圍：0.5ng/ml~16ng/ml
貨號：YS-E989375
?保存條件：2-8℃低溫保存
保質(zhì)期：6個月，所有試劑盒均提供批次,。
試劑盒成分：酶標(biāo)板,，試劑，標(biāo)準(zhǔn)品等,。
選型：
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T
96T指可以做94個標(biāo)本-2個標(biāo)準(zhǔn)對照-84個樣本
48T指可以做47個標(biāo)本-1個標(biāo)準(zhǔn)對照-42個樣本

主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等,。
試劑盒種屬：馬鈴薯、鹿,、羊,、雞、鴨,、魚,、人,、大鼠、小鼠,、豚鼠,、倉鼠、裸鼠,、兔子,、豬、犬,、猴,、馬、牛等動植物,。
檢測目的：用于測定血清,，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、灌洗液,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成：

樣本要求：
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2．不能檢測含 NaN3 的樣品,，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1,、手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,；在實(shí)驗(yàn)臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次,；將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),，浸泡1-2分鐘，根據(jù)需要,，重復(fù)此過程數(shù)次,。
2、自動洗板：如果有自動洗板機(jī),，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中,。
3,、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果，因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的,，不能混用其他商的產(chǎn)品,。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會得到的檢測結(jié)果。
4,、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中,。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染，試劑避免受到微生物的污染,，因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果,。
5、濃洗滌液會有鹽析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,。 
6、剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),，此為正?，F(xiàn)象，不會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響,。
7,、所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置,。
8,、有效期：6個月。
PLC/PRF/5(肝癌亞力山大細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 293T/17 [HEK 293T/17] (胚腎細(xì)胞)Boc-L-beta-谷氨酸5-芐酯質(zhì)量規(guī)格：0.98Boc-L-ß-homoaspartic acid 5-benzyl ester

CL-0236U-2 OS(骨肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2Fmoc-L-β-谷氨酸5-叔丁基酯質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRFmoc-β-homoaspartic acid

IL1R1 Others Human  IL1R1 / CD121a 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Fmoc-L-beta-高谷氨酸6-叔丁酯質(zhì)量規(guī)格：0.98Fmoc-L-β-Homoglutamic acid 6-tert-butyl ester

肺動脈成纖維細(xì)胞cDNAHPAF cDNA高精氨酸質(zhì)量規(guī)格：98%,，BR，L型H-HomoArg-OH

HCC38細(xì)胞,，導(dǎo)管癌細(xì)胞 昆蟲細(xì)胞系,SF-9細(xì)胞 肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)BOC-D-纈氨酸質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBoc-D-Val-OH
腎臟上皮細(xì)胞HREpiC4-羥基心得安β-D-葡萄糖苷酸 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口4-Hydroxy Propranolol β-D-Glucuronide

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/New York/18/2009) HA 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) S(-)-鹽酸心得安質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口S(-)-Propranolol • HCl

IEC-6 大鼠小腸引窩上皮細(xì)胞雷洛昔芬-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Raloxifene-d4

CM-H115腦動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL雷洛昔芬6-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Raloxifene 6-Glucuronide

U266B1 [U266], 多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞(+)-兒茶素水合物質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,進(jìn)分(+)-Catechin hydrate
SK-HEL-1細(xì)胞,，皮膚色素瘤細(xì)胞 鱗癌細(xì)胞(高分化),HCC 94細(xì)胞 支氣管上皮細(xì)胞總RNAHBEpiC NA二本胺磺酸鈉100毫克2～8℃

非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1甘膽酸 Glycocholic acid hydrate, ≥97%  100MG 通用試劑

FGF9 Others Human  FGF9 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-瓜安醋 L-Citrullinq 37-72-8

KM小鼠子瘤株;U14纖維素透析袋500U保存：-20℃

PROCR Others Mouse 小鼠 Epcr / PROCR 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 吧豆醛(劇毒)notonel7exy7e
巢蛋白免費(fèi)代測試劑盒輸尿管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)叔丁氧羰基-L-天冬氨酸-4-叔丁酯 Boc-Asp(OtBu)-OH質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

CREB3L1 Others Human  CREB3L1 / OASIS (aa 396-519) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) BOC-D-脯氨酸Boc-D-Pro-OH質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

大鼠氣管上皮細(xì)胞;RTEBOC-L-絲氨酸甲酯Boc-Ser-OMe質(zhì)量規(guī)格：BR

PG49細(xì)胞，肺腺癌細(xì)胞系 轉(zhuǎn)S9基因倉鼠卵巢細(xì)胞,ZA1細(xì)胞 CL-0042BxPC-3(原位胰腺腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2N-BOC-O-芐基-L-絲氨酸N-BOC-O-Benzyl-L-serine質(zhì)量規(guī)格：0.98

SVEC4-10(小鼠結(jié)內(nèi)皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2BOC-L-蘇氨酸Boc-Thr-OH質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報告的酶,。,，酶是一種有機(jī)催化劑，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象,。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋,。   24μg/ml    5號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 12μg/ml    4號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 6μg/ml     3號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 3μg/ml     2號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 1.5μg/ml   1號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻,。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去,，如此重復(fù)5次,，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,，空白孔除外,。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5,。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。