產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 科研 |
英文名稱 | Recombinant Carbohydrate Synthase 3 (CHSY3) | 物種 | Homo sapiens (Human,,人) |
來(lái)源 | 原核表達(dá) | 應(yīng)用 | Cell culture; Activity Assa |
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上海研生實(shí)業(yè)有限公司 |
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更新時(shí)間:2023-03-31 15:29:13瀏覽次數(shù):263
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 科研 |
英文名稱 | Recombinant Carbohydrate Synthase 3 (CHSY3) | 物種 | Homo sapiens (Human,,人) |
來(lái)源 | 原核表達(dá) | 應(yīng)用 | Cell culture; Activity Assa |
僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 性狀 | 來(lái)源 |
糖合酶3(CHSY3)重組蛋白 | Homo sapiens (Human,,人) | 凍干粉 | 原核表達(dá) |
英文名稱:Recombinant Carbohydrate Synthase 3 (CHSY3)
CSS3; Chondroitin glucuronyltransferase 3; Glucuronosyl-N-acetylgalactosaminyl-proteoglycan 4-beta-N-acetylgalactosaminyltransferase II; N-acetylgalactosaminyltransferase 3
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::分泌
預(yù)測(cè)分子量:26.3kDa
實(shí)際分子量:26kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))
片段與標(biāo)簽:Glu685~Ser882 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點(diǎn):5.3
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg
標(biāo)簽選擇:
親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過(guò)程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過(guò)程變得更加容易,;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標(biāo)簽可分兩類(lèi):一類(lèi)是短肽類(lèi)標(biāo)簽;一類(lèi)是長(zhǎng)肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá),。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來(lái)分析,。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:
真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達(dá)載體的構(gòu)建
c. 無(wú)內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
e. 表達(dá)小試,,條件優(yōu)化
f. 表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達(dá)
h. 親和純化
i. 檢測(cè)和鑒定
原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株
e. 蛋白表達(dá)小試分析
f. 如果蛋白可溶,,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來(lái)制備可溶蛋白,。
h. 鑒定,,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白,;表達(dá)蛋白的分析、純化,、檢測(cè)
誘導(dǎo)表達(dá)成功后,表達(dá)蛋白的分析,、純化,、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng),按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒(méi)太大的問(wèn)題,。
注意事項(xiàng):
1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類(lèi)以及組織塊的大小來(lái)調(diào)整固定時(shí)間,。
2,、雖然作用溫和,但能硬化組織,,固定時(shí)間過(guò)久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過(guò) 24 小時(shí),。
3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結(jié)果。因此,,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí),,有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),,然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。
4,、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,操作時(shí)請(qǐng)小心,,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5、為了您的安全和健康,,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作
相關(guān)產(chǎn)品:
甲硫氨酰tRNA合成酶2(MARS2)重組蛋白 物種,; Mus musculus (Mouse,小鼠) 來(lái)源,; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉
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操作步驟 :
根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加),。
1,、樣品前處理:
a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,,用 PBS,、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。
b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,,用手指把細(xì)胞用力彈散,。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞,。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀,。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管,,然后再裂解,。
c)對(duì)于組織樣品: 切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,,直至充分裂解。
2,、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,,取上清,,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作,。
匙形古柏線蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Cooperia punctataPCR 50T
鼠痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Mouse Pox Virus(MPV)PCR 50T
水牛泰勒蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Theileria buffeliPCR 50T
碩大利什曼原蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Leishmania majorPCR 50T
T7 tag(recombinant T7-tagged proteins) T7 tag標(biāo)簽抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-5-LOX 5-脂氧合酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-CK8 (Ser23) 0酸化細(xì)胞角蛋白8抗體 規(guī)格 0.1ml
羊抗小鼠IgG-F(ab)2血清 0.5ml 國(guó)產(chǎn)
XRCC3 英文名稱: X射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白3抗體 0.2ml
DUSP2 英文名稱: 雙特異性0酸酶2抗體 0.2ml
Anti-5-LOX 5-脂氧合酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
糖合酶3(CHSY3)重組蛋白鉛黃腸球菌PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Enterococcus casseliflavusPCR
腔闊盤(pán)吸蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Eurytrema coelomaticumPCR
禽阿爾法皰疹病毒型=馬立克病病毒PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Gallid Alphaherpesvirus 2 (GaHV2)2(=)PCR
禽杯狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Fowl CalicivirusRTPCR