詳細介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素,;
②試劑因素,;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,,必能得出準確的實驗結(jié)果,,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱:G1-S特異性細胞周期蛋白E1免費代測試劑盒
英文名稱:G1/S-specific cyclin-E1
檢測范圍:25pg/ml~800pg/ml
貨號:YS-E989351
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個月,,所有試劑盒均提供批次,。
試劑盒成分:酶標板,試劑,,標準品等,。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個標本-2個標準對照-84個樣本
48T指可以做47個標本-1個標準對照-42個樣本
主要成分:酶標板,試劑,標準品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯,、鹿,、羊、雞,、鴨,、魚、人,、大鼠,、小鼠、豚鼠,、倉鼠,、裸鼠、兔子,、豬,、犬、猴,、馬,、牛等動植物。
檢測目的:用于測定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、灌洗液、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標準品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
樣本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,,提取后應(yīng)盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
2400 ng/L | 5 號標準品 | 150µl 的原倍標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號標準品 | 150µl 的 5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
600ng/L | 3 號標準品 | 150µl 的 4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
300ng/L | 2 號標準品 | 150µl 的 3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
150ng/L | 1 號標準品 | 150µl 的 2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
實驗注意事項:
1,、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,,酶標板朝下用力拍幾次,;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,,根據(jù)需要,,重復(fù)此過程數(shù)次。
2,、自動洗板:如果有自動洗板機,,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
3,、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果,因為所有試劑都是有關(guān)聯(lián)的,,不能混用其他商的產(chǎn)品,。只有嚴格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會得到的檢測結(jié)果。
4,、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中,。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,,因為蛋白水解酶的干擾將導(dǎo)致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果,。
5、濃洗滌液會有鹽析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,。
6、剛開啟的酶標板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),,此為正?,F(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。
7,、所有的樣品都應(yīng)管理好,,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
8,、有效期:6個月,。
P3X63Ag8.653小鼠骨髓瘤細胞 Mouse myeloma cell line P3X63Ag8.653 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS多奈哌齊質(zhì)量規(guī)格:>98%Donepezil
IL12A & IL12B Protein Human 重組 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白多尼培南(標準品)質(zhì)量規(guī)格:>99%,標準品,一水合物Doripenem
USMC(大鼠血管平滑肌細胞) 5×106cells/瓶×2 HAVSMC, 主動脈平滑肌細胞米爾貝1質(zhì)量規(guī)格:A3+A4>97%Milbemycin oxime
CM-R089大鼠皮膚肥大細胞*培養(yǎng)基100mL伐地考昔質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRValdecoxib
CD14 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD14 細胞裂解液 (陽性對照) 胃膜素,胃粘蛋白,胃泌素質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRGastrin I,human
中國倉鼠肺細胞;V79異蓮心堿(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Isoliensinine
GHR Others Mouse 小鼠 GHR 細胞裂解液 (陽性對照) 蓮心堿高氯酸鹽(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標準品Liensinine Perchlorate
細胞凍存液CFM丁1基苯酞(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標準品川芎提取,液體3-Butylidenephthalide
FLT3 Others Mouse 小鼠 FLT-3 / CD135 / FLK-2 細胞裂解液 (陽性對照) 茯苓酸(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Pachymic acid
胃腺癌細胞;BGC-823大黃素(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標準品Emodin
VERO細胞,,非洲綠猴腎細胞 大細胞肺癌細胞,NCI-H661細胞 CL-0420R 1610(倉鼠肺細胞)5×106cells/瓶×2二(2-乙基己基)嶙酸酯,英文名或英文縮寫:P-204,,級別:BR,,25-28%,規(guī)格:500克
倉鼠腎細胞;HL-1本迷;大茴香迷;茴香迷;氧基本;基本基迷 cnisolq;Mqthoxybqnzqnq
GRN Others Human Granulin / GRN 細胞裂解液 (陽性對照) READYLADDER,50BPDNAMARKERDNA MARKER生物技術(shù)級暗紫色不透明液體FROZENsigma
GC-1, 鼠精原細胞鎢酸鉀,,英文名或英文縮寫:potewwium tungstate,,級別:AR,95%,,規(guī)格:500克
CD40LG Others Cynomolgus 食蟹猴 CD40L / CD154 / TNFSF5 細胞裂解液 (陽性對照) (轉(zhuǎn)鐵蛋白)
G1-S特異性細胞周期蛋白E1免費代測試劑盒腎系膜細胞Many types of cells包裝:5 ×105方(1ml)雙羥萘酸(標準品)Pamoic acid質(zhì)量規(guī)格:含量測定
AGER Others Human AGER / RAGE 細胞裂解液 (陽性對照) 酚酞(標準品)Phenolphthalein質(zhì)量規(guī)格:含量測定
大鼠前列腺上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL香草醛(熔點標準品) Vanillin質(zhì)量規(guī)格:熔點測定
BRL大鼠肝細胞 Rat hepatic cells BRL DMEM+10%FBS環(huán)吡酮;環(huán)匹羅司Ciclopirox質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
IGFBP7 Protein Human 重組 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (Fc 標簽)環(huán)吡酮;環(huán)匹羅司(標準品)Ciclopirox質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶,。,酶是一種有機催化劑,,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系,。
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 24μg/ml 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
12μg/ml 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
6μg/ml 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
3μg/ml 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
1.5μg/ml 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔,、標準孔,、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù)5次,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3,。
8. 洗滌:操作同5,。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測定:以空白空調(diào)零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。