詳細(xì)介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定,。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果,。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素,;
③操作因素,。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù),!
產(chǎn)品名稱:鈣鎂ATP酶免費(fèi)代測(cè)試劑盒規(guī)格
英文名稱:Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase
檢測(cè)范圍:62.5pg/ml~2000pg/ml
貨號(hào):YS-E989446
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個(gè)月,所有試劑盒均提供批次,。
試劑盒成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等,。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個(gè)標(biāo)本-2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-84個(gè)樣本
48T指可以做47個(gè)標(biāo)本-1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-42個(gè)樣本
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等,。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿,、羊,、雞、鴨,、魚,、人、大鼠,、小鼠,、豚鼠、倉(cāng)鼠,、裸鼠,、兔子、豬,、犬,、猴、馬,、牛等動(dòng)植物,。
檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測(cè)包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、灌洗液、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說(shuō)明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個(gè) |
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性,。
2400 ng/L | 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1,、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次,;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),,浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次,。
2、自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測(cè)效果,,因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的,,不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說(shuō)明操作才會(huì)得到的檢測(cè)結(jié)果,。
4,、在儲(chǔ)存及孵育過(guò)程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,,試劑避免受到微生物的污染,,因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。
5,、濃洗滌液會(huì)有鹽析出,,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
6,、剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會(huì)有少許水樣物質(zhì),,此為正常現(xiàn)象,,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響,。
7、所有的樣品都應(yīng)管理好,,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置,。
8、有效期:6個(gè)月,。
SV40T轉(zhuǎn)化臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;PUMC-HUVEC-T1果膠(半乳糖醛酸(干基計(jì))≥74.0 %)質(zhì)量規(guī)格:半乳糖醛酸(干基計(jì))≥74.0 %Pectin
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Hong Kong/483/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1酸三丁酯(AR,99%)質(zhì)量規(guī)格:AR,99%Tributyl phosphate
CL-0184PANC-1(胰腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×21酸三丁酯(CP)質(zhì)量規(guī)格:CPTributyl phosphate
TNK2 Others Human ACK1 / TNK2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1酸三丁酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Tributyl phosphate
上皮細(xì)胞裂解物HMEpiCL3,5-二水楊酸鋰(>98%,,BC)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCLithium 3,5-diiodosalicylate
TNFRSF21 Others Human DR6 / TNFRSF21 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) N-芐氧羰基-D-色酸,,英文名或英文縮寫:CBZ-D-Trp,,級(jí)別:特,98%,,規(guī)格:10克
神經(jīng)元RNAHN miRNA5 μg均本四加臘酐 1,2,4,5-Bqnzqnqtqtrcccrboxylic cnhydridq 1989/3/7
FCER1A Others Human FcERI / FCER1A 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 米力農(nóng)相關(guān)物質(zhì)A Milrinonq Rqlctqd CoMpound c;1,6-Dixy7no-2-Mqthyl-6-oxo(3,4'-bipyridinq)-5-ccrboxcMidq 80047-4-1
冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL四乙酸二基二鈉鹽,,英文名或英文縮寫:EDTA-2Na,,級(jí)別:BR,99%,,規(guī)格:1克
3T3NIH細(xì)胞,,小鼠成纖維細(xì)胞 HUVEC(臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞) 小鼠垂體瘤細(xì)胞;GT1-1GDX 502(聚二本多孔小球)NA
成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)添加物(不含動(dòng)物成分)FGS-acf環(huán)辛酮,英文名或英文縮寫:Cyclooctane,,級(jí)別:BR,97%,,規(guī)格:25克
白牦牛皮膚細(xì)胞;Yak-2 橫紋肌瘤細(xì)胞,,A673細(xì)胞 NAMALWA(Butt's 瘤細(xì)胞)4,7-二本基-1,10-啰啉 Bcthophqncnthrolinq 166-01-7
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;Mao鄰本二酸二辛酯,,英文名或英文縮寫:DIOP,,級(jí)別:CP,94%,,規(guī)格:100克
IL11RA Others Human IL11RA / IL11Rα 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) CarboxypeptidaseY(Yeast)羧肽酶Y(酵母)100克細(xì)胞培養(yǎng)級(jí),,85%
T-108B膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL.6-二基1,6-HEXANEDIAMINE
鈣鎂ATP酶免費(fèi)代測(cè)試劑盒規(guī)格VNN2 Others Human VNN2 / Vanin-2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 酮舍林1酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)Ketanserin Tartrate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小腸隱窩上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)酮康唑Ketoconazole質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
ERP27 Others Human ERP27 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 酮康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)Ketoconazole質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠膀胱上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL霉素,柱晶白霉素Kitasamycin質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)≥1300U/MG,BR
HL-60原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞 HL-60 primary human myeloid leukemia cells IMDM(GIBCO)+20%FBS拉坦前列腺素Latanoprost質(zhì)量規(guī)格:含量>99.0%
使用方法:
測(cè)定法的靈敏度來(lái)自作為報(bào)告的酶。,,酶是一種有機(jī)催化劑,,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象,。因此該體系常被稱為酶放大體系,。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋,。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測(cè)樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動(dòng)混勻,。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù)5次,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外,。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5,。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值),。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。