詳細(xì)介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果,。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素,;
②試劑因素;
③操作因素,。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù),!
產(chǎn)品名稱:SCAMP3免費(fèi)代測試劑盒
英文名稱:secretory carrier membrane protein 3
檢測范圍:62.5pg/ml~2000pg/ml
貨號:YS-E989291
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個月,,所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分:酶標(biāo)板,,試劑,,標(biāo)準(zhǔn)品等。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個標(biāo)本-2個標(biāo)準(zhǔn)對照-84個樣本
48T指可以做47個標(biāo)本-1個標(biāo)準(zhǔn)對照-42個樣本
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等,。
試劑盒種屬:馬鈴薯,、鹿、羊,、雞,、鴨、魚,、人,、大鼠、小鼠,、豚鼠,、倉鼠、裸鼠,、兔子、豬、犬,、猴,、馬、牛等動植物,。
檢測目的:用于測定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、灌洗液,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L | 5 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1,、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,;在實(shí)驗(yàn)臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次,;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),,浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,,重復(fù)此過程數(shù)次,。
2、自動洗板:如果有自動洗板機(jī),,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中,。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果,,因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的,,不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會得到的檢測結(jié)果,。
4,、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,,因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果,。
5、濃洗滌液會有鹽析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,。
6、剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),,此為正?,F(xiàn)象,不會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響,。
7,、所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置,。
8,、有效期:6個月。
MDA-MB-231, 癌細(xì)胞N-乙酰氨基葡萄糖(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品N-Acetyl-D-Glucosamine
非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H157 大鼠成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL托吡卡胺(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Tropicamide
H-4-II-E 大鼠肝細(xì)胞瘤細(xì)胞奧拉西坦(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:供檢查用Oxiracetam
CD28 Others Human CD28 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸貝凡洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Bevantolol
615小鼠前胃癌瘤株;Fc鹽酸奧昔布寧(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Oxybutynin HCl
TNFSF10 Protein Human 重組 TNFSF10 / AIL / APO-2L / CD253 蛋白布里杰35,,英文名或英文縮寫:Brij-35,,級別:BR,70%,,規(guī)格:100毫克
上皮細(xì)胞(HMEpiC) (5×105) THP-1單核白血病細(xì)胞 Human2-肖基本安(易制暴) 2-nitnocnilinq
胚腎細(xì)胞;293 Cells, low passageα-D-半乳糖苷半乳糖水解酶,,英文名或英文縮寫:α-Galactosidase preparation from green coffee beans,級別:標(biāo)準(zhǔn)品,,7萬u/mg,,規(guī)格:5克
SEZ6L2 Others Human SEZ6L2 / PSK-1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 龍膽酸,英文名或英文縮寫:DHB,,級別:高,,98%,規(guī)格:100克
CL-0392NCI-H2087(非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2554-95-0均本三 95%Trimesic acid
HL-60, 早幼粒白血病細(xì)胞 單核細(xì)胞-巨噬細(xì)胞,RAW264.7細(xì)胞 Hep G2(肝癌細(xì)胞)1,4-二(4-甲基-5本基-2-咪唑)本1克2~8℃,,避光
小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]Perilloxin Perilloxin (HPLC,≥98%) 263249-77-0 5MG 通用試劑
HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Florida/4/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 流化亞鐵;流化鐵 Iron sulfidq 1317-37-9
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KM932三氧化二銻10克RT
6. 腸胃細(xì)胞系統(tǒng)成套pH緩沖劑NA
SCAMP3免費(fèi)代測試劑盒滋養(yǎng)層絨毛細(xì)胞總RNAHVT NA偏苯三1(>95.0%(T))Trimellitic Anhydride質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)
小鼠神經(jīng)皮質(zhì)細(xì)胞(MN-c)(1×106)2,4-二氨基-6-異丙氧基-1,3,5-三嗪(>98.0%(T))2,4-Diamino-6-isopropoxy-1,3,5-triazine質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
家貓皮膚細(xì)胞;FCA-S12,4-二氨基-1,3,5-三嗪(>98.0%(T))2,4-Diami*,3,5-triazine質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;W6/32 小鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL2,4-氨基-6-甲氧基-1,3,5-三嗪(>98.0%(T))2,4-Diamino-6-methoxy-1,3,5-triazine質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
SF9, 昆蟲卵巢細(xì)胞 其它2,4-二氨基-6-二甲氨基-1,3,5-三嗪(>98.0%(T))2,4-Diamino-6-dimethylami*,3,5-triazine質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶,。,酶是一種有機(jī)催化劑,,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系,。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外,。
7. 溫育:操作同3,。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。