尿卟啉原脫羧酶(UROD)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品：腺苷激酶(ADK)重組蛋白 物種,； Mus musculus (Mouse，小鼠) 來(lái)源； 原核表達(dá) 性狀：凍干粉 羥酸氧化酶2(HAO2)重組蛋白 物種,； Rattus norvegicus (Rat，大鼠) 來(lái)源,； 原核表達(dá) 性狀：凍干粉 脂肪酶H(LIPH)重組蛋白 物種,； Homo sapiens (Human，人) 來(lái)源,； 原核表達(dá) 性狀：凍

僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性：

英文名稱(chēng)：Recombinant Uroporphyrinogen Decarboxylase (UROD)

PCT; Uroporphyrinogen III Decarboxylase

酶與激酶

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：分泌

預(yù)測(cè)分子量：44.5kDa

實(shí)際分子量：43kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Met1~Asn367 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4,，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：5.8

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

標(biāo)簽選擇：

親和標(biāo)簽：蛋白重組表達(dá)過(guò)程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過(guò)程變得更加容易,；另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類(lèi)：一類(lèi)是短肽類(lèi)標(biāo)簽,；一類(lèi)是長(zhǎng)肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達(dá),。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來(lái)分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,，大致步驟如下：

真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟：

a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞（常用的CHO和HEK293）

b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

c.      無(wú)內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

e.      表達(dá)小試,，條件優(yōu)化

f.       表達(dá)分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）

g.      大量表達(dá)

h.      親和純化

i.        檢測(cè)和鑒定

原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟：

a.      選擇表達(dá)載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

e.      蛋白表達(dá)小試分析

f.       如果蛋白可溶，蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,，則需要變復(fù)性來(lái)制備可溶蛋白,。

h.      鑒定，包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白,；表達(dá)蛋白的分析,、純化、檢測(cè)

　　誘導(dǎo)表達(dá)成功后,，表達(dá)蛋白的分析,、純化、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng),，按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒(méi)太大的問(wèn)題,。

注意事項(xiàng)：  

1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類(lèi)以及組織塊的大小來(lái)調(diào)整固定時(shí)間,。

2、雖然作用溫和,，但能硬化組織,，固定時(shí)間過(guò)久會(huì)導(dǎo)致組織變脆，切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過(guò) 24 小時(shí),。

3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色,，影響免疫組化結(jié)果,。因此，4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí),，有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),，然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

4,、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,，操作時(shí)請(qǐng)小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。

5,、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作

相關(guān)產(chǎn)品：

磷酸二酯酶5A(PDE5A)重組蛋白 物種,； Homo sapiens (Human,，人) 來(lái)源； 原核表達(dá) 性狀：凍干粉

p21蛋白激活激酶2(PAK2)重組蛋白 物種,； Homo sapiens (Human,，人) 來(lái)源； 原核表達(dá) 性狀：凍干粉

ATP依賴(lài)性DNA連接酶Ⅰ(LIG1)重組蛋白 物種,； Homo sapiens (Human,，人) 來(lái)源； 原核表達(dá) 性狀：凍干粉

操作步驟 ：

根據(jù)使用量,，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?；靹騻溆茫?span>PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加）,。

1、樣品前處理：

a)對(duì)于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液,，用 PBS,、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。

b)對(duì)于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞,，用手指把細(xì)胞用力彈散,。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞,。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀,。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管,，然后再裂解,。

c)對(duì)于組織樣品： 切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,，直至充分裂解。

2,、后處理：

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定,、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作。

犬新孢子蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng); Neospora caninumPCR 50T

人免疫缺陷病毒型通用PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng); Human Immunodeficiency Virus 1(HIV1)IRTPCR 50T

肉芽腫鞘桿菌PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng); Calymmatobacterium granulomatisPCR 50T

沙雷菌通用PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng); Serratia spp.PCR 50T

SLC33A1(Acetyl-coenzyme A transportor 1) 乙酰轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-BKCa channels 鈣激活通道蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PG-C/Pepsinogen 2 胃原C抗體 規(guī)格 0.1ml

EMA 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝

Tap1 英文名稱(chēng)： ATP結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)因子1抗體 0.2ml

CD170 英文名稱(chēng)： 唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素5抗體 0.1ml

Anti-BKCa channels 鈣激活通道蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

尿卟啉原脫羧酶(UROD)重組蛋白島青霉PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng); Penicillium islandicumPCR

低致病性豬生殖與呼吸綜合癥病毒PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng); Low Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus(PRRSV)RTPCR

地衣形芽孢桿菌PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng); Bacillus licheniformisPCR

東方泰勒蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng); Theileria orientalisPCR