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半胱氨酰tRNA合成酶(CARS)重組蛋白

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更新時間:2023-03-31 16:41:49瀏覽次數(shù):237

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 說明書
應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)
英文名稱 Recombinant Cysteinyl tRNA Synthetase (CARS) 物種 Mus musculus (Mouse,小鼠)
來源 原核表達(dá) 應(yīng)用 Cell culture; Activity Assa
半胱氨酰tRNA合成酶(CARS)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:脂肪酸去飽和酶2(FADS2)重組蛋白 物種,; Homo sapiens (Human,人) 來源; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉 線粒體甘油-3-磷酸?;D(zhuǎn)移酶(GPAM)重組蛋白 物種; Homo sapiens (Human,,人) 來源,; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉 組蛋白脫乙酰基酶1(HDAC1)活性蛋白 物種,; Homo sapiens (Hu

詳細(xì)介紹

相關(guān)產(chǎn)品:

AMP激活蛋白激酶γ2(PRKAg2)重組蛋白 物種,; Mus musculus (Mouse,小鼠) 來源,; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉

Janus激酶1(JAK1)重組蛋白 物種,; Mus musculus (Mouse,小鼠) 來源,; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉

酪蛋白激酶1α1(CSNK1a1)重組蛋白 物種,; Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 來源,; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉

僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

性狀

來源

半胱氨酰tRNA合成酶(CARS)重組蛋白

Mus musculus (Mouse,,小鼠)

凍干粉

原核表達(dá)

英文名稱:Recombinant Cysteinyl tRNA Synthetase (CARS)

CARS1; CysRS; Cysteine tRNA Ligase 1,Cytoplasmic; Cysteinyl-tRNA synthetase

酶與激酶

物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::分泌

預(yù)測分子量:58.6kDa

實(shí)際分子量:59kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Ala2~Leu249 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% TrehaloseProclin300.

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點(diǎn):8.9

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

1.png

標(biāo)簽選擇:

親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽,;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá),。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHOHEK293

b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染

e.      表達(dá)小試,,條件優(yōu)化

f.       表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAEWB

g.      大量表達(dá)

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

e.      蛋白表達(dá)小試分析

f.       如果蛋白可溶,,蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白,。

h.      鑒定,,包括SDS-PAGEWB鑒定

GZMH蛋白;表達(dá)蛋白的分析,、純化,、檢測

  誘導(dǎo)表達(dá)成功后,表達(dá)蛋白的分析,、純化,、檢測應(yīng)該順當(dāng),按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題,。

操作步驟 :

根據(jù)使用量,,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF zui終濃度為 1mM,?;靹騻溆茫?span>PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

1,、樣品前處理:

a)對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸,。

b)對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞,。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,,然后再裂解。

c)對于組織樣品: 切成細(xì)小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當(dāng)減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,,直至充分裂解。

2,、后處理:

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作。

豬類圓線蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Strongyloides ransomiPCR 50T

豬瘟病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Classical Swine Fever Virus(CSFV)RTPCR 50T

棕蜱通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Rhipicephalus spp.PCR 50T

住白細(xì)胞原蟲屬通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Leucocytozoon spp.PCR 50T

ROCK1 (Rho-associated coiled-coil containing protein kinase 1) Rho相關(guān)蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

Anti-Phospho-Bad(Ser112) 0酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh PHKA1 0酸α1抗體 規(guī)格 0.2ml

Keratin6 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝

URAT1/SLC22A11 英文名稱: 尿酸鹽重吸收轉(zhuǎn)運(yùn)子1抗體 0.1ml

Phospho-CD18 (Thr758) 英文名稱: 0酸化整合素β2/Integrin β2抗體 0.1ml

Anti-Phospho-Bad(Ser112) 0酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

半胱氨酰tRNA合成酶(CARS)重組蛋白禽痘病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Avian Pox virus=Fowl Pox Virus,、FPVPCR

禽類肉瘤病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Avian Sarcoma Virus(ASV)RTPCR

禽皰疹病毒型PCR檢測試劑盒 英文名稱; Gallid Herpesvirus 11PCR

禽腎炎病毒型PCR檢測試劑盒 英文名稱; Avian Nephritis Virus 2ANV22RTPCR

注意事項(xiàng):  

1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間,。

2、雖然作用溫和,,但能硬化組織,,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時,。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果,。因此,,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),,然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作,。

4、本產(chǎn)品對人體有害,,操作時請小心,,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5,、為了您的安全和健康,,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作


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