詳細(xì)介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定,。 但ELISA測定中影響因素較多,,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,,有時常見到一些錯誤的結(jié)果,。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素,;
③操作因素,。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù),!
產(chǎn)品名稱:尿白三烯免費代測試劑盒
英文名稱:leukotrienes
檢測范圍:0.625ng/ml~20ng/ml
貨號:YS-E989343
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個月,,所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分:酶標(biāo)板,,試劑,,標(biāo)準(zhǔn)品等。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個標(biāo)本-2個標(biāo)準(zhǔn)對照-84個樣本
48T指可以做47個標(biāo)本-1個標(biāo)準(zhǔn)對照-42個樣本
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等,。
試劑盒種屬:馬鈴薯,、鹿、羊,、雞,、鴨、魚,、人,、大鼠、小鼠,、豚鼠,、倉鼠、裸鼠,、兔子,、豬、犬,、猴,、馬、牛等動植物,。
檢測目的:用于測定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、灌洗液,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗,。若不能馬上進(jìn)行試驗,,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
2400 ng/L | 5 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實驗注意事項:
1、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),,浸泡1-2分鐘,,根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次,。
2,、自動洗板:如果有自動洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中,。
3,、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果,因為所有試劑都是有關(guān)聯(lián)的,,不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會得到的檢測結(jié)果,。
4,、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,,試劑避免受到微生物的污染,,因為蛋白水解酶的干擾將導(dǎo)致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。
5,、濃洗滌液會有鹽析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
6,、剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),,此為正常現(xiàn)象,,不會對實驗結(jié)果造成任何影響,。
7、所有的樣品都應(yīng)管理好,,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置,。
8、有效期:6個月,。
OCM-1A細(xì)胞,,低侵襲性脈絡(luò)膜色素素瘤細(xì)胞 綠色木霉 小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞;DCS2-氨基環(huán)乙醇質(zhì)量規(guī)格:>98%,日本*2-Aminocyclohexanol
CCL28 Protein Human 重組 CCL28 蛋白 (His 標(biāo)簽)Y-27632.2HCl質(zhì)量規(guī)格:>98%,ROCK1(p160ROCK) 選擇性抑制劑Y27632
LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 Cardioophin-1 / CTF1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 靈芝酸A(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品Ganoderic acid A
豬腎細(xì)胞;PK(15)蝙蝠葛蘇林堿(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:≥96%,標(biāo)準(zhǔn)品Daurisoline
TGFB1 Others Rat 大鼠 TGF-beta 1 / TGFB1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 硒吩(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)Selenophene
FCGR2B Others Human CD32b / FCGR2B 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) BENZAMIDINExy7noCHLORIDE芐脒,HCl蛋白組學(xué)級100G1670-14-0COLD
胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-52-錄-5-肖基本加醋 2-Chloro-5-nitnobqnzoic ccid 216-96-3
PGA4 Others Human PGA4 / Pepsinogen A 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) SSPEBUFFERTAETSSSPE 緩沖液,蛋白組學(xué)級100 TAETSRT
Hce-8693 盲腸腺癌細(xì)胞(未分化)肝素溶液支RT
293T胚腎細(xì)胞 Human embryonic kidney cell line 293T 胚腎細(xì)胞126213-50-13,4-二氧3,4-etxylenedioxythiopxene
PTN Others Mouse 小鼠 Pleioophin / PTN / HB-GAM 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸,,英文名或英文縮寫:Pyridine xy7nochloride,,級別:AR,88%,,規(guī)格:5克
胃癌組織源性原代成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)/1ml三錄化銻(*);錄化亞銻;錄化銻 cntiMonous chloridq;trichloro-Stibinq 1002-91-9
獼猴肺細(xì)胞;MML2 肝癌細(xì)胞,,SNU-398細(xì)胞 CNE(鼻咽癌細(xì)胞)AntibodySignalEnhancer抗體信號增強劑蛋白組學(xué)級透明液體,搖晃時有氣泡RTsigma
B細(xì)胞瘤細(xì)胞;RAMOS葡萄酸銅,,英文名或英文縮寫:Cupric tartrate trihydrate,,級別:CP,98%,,規(guī)格:500克
SERPINF2 Others Human SerpinF2 / SERPINF2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Amylopectin 1g/5g/10g/25g原裝 Sigma A8515
尿白三烯免費代測試劑盒SW626(卵巢癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2去甲異波爾定(標(biāo)準(zhǔn)品)Norisoboldine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標(biāo)準(zhǔn)品
HAoEC-c 主動脈內(nèi)皮細(xì)胞(HAoEC) 500,000cells 腦成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)去氫二異丁香酚(標(biāo)準(zhǔn)品)Dehydrodiisoeugenol質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
腎動脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)去氫鉤藤堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Corynoxeine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標(biāo)準(zhǔn)品
MUC1 Others Human Mucin-1 / MUC-1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 去氫木香內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Dehydrocostus Lactone質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標(biāo)準(zhǔn)品
OK 負(fù)鼠腎細(xì)胞染料木苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Genistin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶,。,,酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象,。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋,。 24μg/ml 5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù)5次,,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,,空白孔除外,。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5,。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。