ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定,。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求,，在檢測過程中除正常反應(yīng)外,，有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素,；
②試劑因素,；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！
產(chǎn)品名稱：環(huán)指蛋白180免費(fèi)代測試劑盒說明
英文名稱：Ring Finger Protein 18
檢測范圍：1.5μg/mL~48μg/mL
貨號：YS-E987518
?保存條件：2-8℃低溫保存
保質(zhì)期：6個月,，所有試劑盒均提供批次,。
試劑盒成分：酶標(biāo)板，試劑,，標(biāo)準(zhǔn)品等,。
選型：
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T
96T指可以做94個標(biāo)本-2個標(biāo)準(zhǔn)對照-84個樣本
48T指可以做47個標(biāo)本-1個標(biāo)準(zhǔn)對照-42個樣本

主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬：馬鈴薯、鹿,、羊,、雞、鴨,、魚,、人、大鼠,、小鼠,、豚鼠、倉鼠,、裸鼠,、兔子、豬,、犬,、猴、馬,、牛等動植物。
檢測目的：用于測定血清,，血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、灌洗液,、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成：

樣本要求：
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),，可將標(biāo)本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2．不能檢測含 NaN3 的樣品,，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1、手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,；在實(shí)驗(yàn)臺上鋪墊幾層吸水紙,，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘,，根據(jù)需要,，重復(fù)此過程數(shù)次。
2,、自動洗板：如果有自動洗板機(jī),，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。
3,、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果,，因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的，不能混用其他商的產(chǎn)品,。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會得到的檢測結(jié)果,。
4、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中,。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,，試劑避免受到微生物的污染，因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果,。
5,、濃洗滌液會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶,。 
6,、剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會有少許水樣物質(zhì)，此為正?，F(xiàn)象,，不會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
7,、所有的樣品都應(yīng)管理好,，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
8,、有效期：6個月,。
CHL1 Others Human  CHL1 / CALL 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 酸性羅丹明B，英文名或英文縮寫：Lissamine rhodamine B,，級別：BS,，規(guī)格：1克

腦血管周細(xì)胞RNAHBVP miRNA5 μg頭孢坐林內(nèi) Cqfczolin 2923-19-9

PLA2G12B Others Mouse 小鼠 PLA2G12B / PLA2G13 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-MINEL-甲(蛋酸)美國藥典級白色至米白色粉末COLDsigma

Kyse510 食管癌細(xì)胞2-環(huán)己基乙磺酸，英文名或英文縮寫：CHES,，級別：IND,，規(guī)格：100克

CL-0394NCI-H2170(肺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2Agar,Bacterological 100g 日本分裝
HNE2, 鼻咽癌細(xì)胞系鄰羥甲基本酸內(nèi)酯，英文名或英文縮寫：Phthalide,，級別：CP,，98%,，規(guī)格：100克

CA4 Others Human  Carbonic Anhydrase IV / CA4 CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 十二水合流醋鐵銨 cmmonium fqrric sulfctq dodqcchydrctq 7783-83-7

胚腎細(xì)胞(亞系克隆);FIP293黃遞酶，英文名或英文縮寫：Diaphorase,，級別：BR,，5000u/g，根霉,，規(guī)格：100克

豹貓肌肉成纖維樣細(xì)胞;LCM4 中國倉鼠體細(xì)胞,，R 1610細(xì)胞 IAR20細(xì)胞，大鼠肝細(xì)胞組織切片清除劑,，英文名或英文縮寫：HistoChoice clearing agent,，級別：3.5N，規(guī)格：100克

胚胎,，皮膚,，肌肉;M-22Bis-Acrylamide 10g/25g Amresco分裝
大額牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-2四丙基氫氧化銨25%溶液Tetrapropylammonium hydroxide 25% solution質(zhì)量規(guī)格：BR

Caki-1, 腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞毒胡蘿卜素(>95% (HPLC),BC)Thapsigargin, from Thapsia garganica質(zhì)量規(guī)格：>95% (HPLC),BC

腦瘤細(xì)胞;SF763 大鼠頜下腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL硫黃素 T(>75%,BS)Thioflavin T質(zhì)量規(guī)格：>75%,BS

食管癌組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)/1ml硫藤黃素(>95%,BC)Thiolutin from Streptomyces luteosporeus質(zhì)量規(guī)格：>95%,BC

GP140 Others HIV 類缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 (group M, subtype CRF07_BC) gp140 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 硫堇(>90%,BS)Thionin質(zhì)量規(guī)格：>90%,BS
環(huán)指蛋白180免費(fèi)代測試劑盒說明WI-38細(xì)胞，二倍體細(xì)胞系 EBV陽性B瘤細(xì)胞,P3HR1細(xì)胞 615小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤瘤株;DCS2-十八1酸單甘油酯2-Oleoylglycerol質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

Bcap-37(癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×21-月桂酰-3-氯1-Lauroyl-3-chloropropanediol質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

CTSL1 Others Human  CTSL1 / Cathepsin-L1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4-丁基苯(>95.0%(GC))4-Butylbenzaldehyde質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

急性T細(xì)胞白血病細(xì)胞;TALL-1044-芐氧基苯(>98.0%(GC))4-Benzyloxybenzaldehyde質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

RET Others Human  RET Kinase 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4-癸氧基苯(>97.0%(GC))4-Decyloxybenzaldehyde質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)
使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報告的酶,。酶是一種有機(jī)催化劑,，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象,。因此該體系常被稱為酶放大體系,。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋,。   24μg/ml    5號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 12μg/ml    4號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 6μg/ml     3號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 3μg/ml     2號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 1.5μg/ml   1號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去,，如此重復(fù)5次，拍干,。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,，空白孔除外,。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5,。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。