測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起,。
3.為避免蒸發(fā),,板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中,。
4.加入底物后,,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),,即可終止酶反應(yīng),。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵,。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色,。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度,、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
我司供應(yīng)的生化檢測(cè)試劑盒,,僅供科研使用。
產(chǎn)品名稱 | 測(cè)定方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
轉(zhuǎn)氫酶-2試劑盒 | 微量法,、紫外分光光度法 | 100管/96樣 ,、50管/48樣 | BJ-01S85317 |
商品介紹:
測(cè)定意義
TH位于線粒體的內(nèi)膜上,又稱為線粒體復(fù)合體六,,催化NADH+NADP+和NAD++NADPH相互轉(zhuǎn)化,,調(diào)節(jié)線粒體NAD(H)和NADP(H)平衡。把逆向反應(yīng)稱為TH-2,,催化NADPH和NAD+生成NADP+和NADH,。
測(cè)定原理
NADH和NADPH均在340nm有特征吸收,因此TH催化的轉(zhuǎn)氫反應(yīng)不能導(dǎo)致340nm吸光度發(fā)生變化,。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸(APAD+)替代NAD+,,TH-2催化APAD+還原生成APADH,APADH在375nm有特征光吸收,,測(cè)定375nm光吸收的增加速率,,來計(jì)算TH-2活性。
需自備的儀器和用品
可見分光光度計(jì),、臺(tái)式離心機(jī),、水浴鍋、可調(diào)式移液器,、1mL玻璃比色皿、研缽,、冰和蒸餾水,。
通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),,可用蒸餾水自行配制PH7.4,,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液,。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存,。
2、液體全部加完后,,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能,。
3,、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,,應(yīng)盡量避免接觸,。
4、檢測(cè)前,,要打開酶標(biāo)儀,,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5,、吸取液體時(shí),,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差,。
6,、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,,液滴會(huì)自然流下去,。
7、溫浴時(shí),,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,,防止水分的蒸發(fā)。
8,、洗板時(shí),,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,,使清洗更加*,。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干,。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確,。
10、底物是光敏感的,,要在臨用前現(xiàn)配,。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),,可用蒸餾水自行配制PH7.4,,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液,。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2,、液體全部加完后,,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,,混勻液體,。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能,。
3、底物有一定的毒性,,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,,應(yīng)盡量避免接觸,。
4,、檢測(cè)前,,要打開酶標(biāo)儀,,使之穩(wěn)定10分鐘以上,。
5、吸取液體時(shí),,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差,。
6,、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,,液滴會(huì)自然流下去,。
7、溫浴時(shí),,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,,防止水分的蒸發(fā),。
8、洗板時(shí),,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,,使清洗更加*。沒有洗板機(jī)時(shí),,倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干,。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10,、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配,。
大鼠平滑肌肌動(dòng)蛋白α2(ACTα2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
大鼠白介素18結(jié)合蛋白(IL18BP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
大鼠硬骨素(SOST)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
大鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
大鼠叉頭框蛋白P3(FOXP3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
大鼠II型膠原α1(COL2α1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
大鼠CD163分子(CD163)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
大鼠補(bǔ)體因子D(CFD)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
大鼠干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞α亞族趨化劑(I-TAC)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
大鼠內(nèi)皮糖蛋白(ENG)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
大鼠脂肪酸結(jié)合蛋白1(FABP1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
大鼠脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
大鼠白介素1受體II(IL-1R2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
大鼠白介素1受體I(IL-1R1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
轉(zhuǎn)氫酶-2試劑盒5902-51-2特草定;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 規(guī)格: 0.1g
1,3,5,8-四羥基山;1,3,5, 規(guī)格: 10mg
毛萼結(jié)甲(95%) 規(guī)格: 20mg
107668-79-1草烏甲 規(guī)格: 50mg
磷;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 規(guī)格: 0.1g
20033 規(guī)格: HPLC≥98%,;20mg/vial
丙那林 規(guī)格: 50mg
442-51-3去氫駱駝蓬 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
1268798木犀草;木犀草-7-O-;青 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
博落回總 對(duì)照品 規(guī)格: 50mg