測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結合物后,,應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱,。
2.各ELISA板不應疊在一起,。
3.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中,。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求,。 如室溫高于20℃,,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,,待對照管顯色適當時,,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,,但卻 是決定實驗成敗的關鍵,。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質(zhì)以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,,在定性測定中一般 可采用目視比色,。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度,、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法,。
我司供應的生化檢測試劑盒,僅供科研使用,。
商品介紹:
測定意義
脂質(zhì)過氧化是動植物體內(nèi)活性氧(ROS)氧化生物膜的過程,,脂質(zhì)過氧化物(LPO)是脂質(zhì)過氧化過程的產(chǎn)物,,即ROS與生物膜的磷脂,、酶和膜受體相關的多不飽和脂肪酸的側鏈及核酸等大分子物質(zhì)起脂質(zhì)過氧化反應形成LPO,使細胞膜的流動性和通透性發(fā)生改變,最終導致細胞結構和功能的改變,。因此,,LPO常被作為機體氧化應激的一種指標,與某些疾病的病理過程,,如腫瘤,、化學中毒、感染,、炎 癥,、自身免疫疾病、動脈粥樣硬化(AS)及心腦血管疾病,,以及衰老等生理過程密切相關,。
測定原理
LPO在酸性條件下加熱,產(chǎn)生小分子終產(chǎn)物MDA,,MDA與硫代酸(thiobarbituric acid,,TBA)縮合,生成紅色產(chǎn)物,,在535nm有最大吸收峰,。
自備實驗用品
酶標儀、水浴鍋,、臺式離心機,、可調(diào)式移液器、96孔板,、研缽,、冰和蒸餾水。
通用規(guī)則:
1,、洗液不夠時,,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,,加入0.1%的吐溫20作為洗液,。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2,、液體全部加完后,,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體,。也可以用酶標儀的晃動功能,。
3、底物有一定的毒性,,終止液對皮膚有腐蝕性,,應盡量避免接觸,。
4、檢測前,,要打開酶標儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上,。
5,、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,,減少誤差,。
6、將液體加到酶標孔中時,,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去,。
7,、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,,防止水分的蒸發(fā),。
8、洗板時,,每次洗液加入后,,應靜置1分鐘,使清洗更加*,。沒有洗板機時,,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干,。
9,、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確,。
10,、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配,。
實驗通用規(guī)則:
1,、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,,0.02M的磷酸緩沖液,,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存,。
2,、液體全部加完后,,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體,。也可以用酶標儀的晃動功能,。
3、底物有一定的毒性,,終止液對皮膚有腐蝕性,,應盡量避免接觸。
4,、檢測前,,要打開酶標儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上,。
5,、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,,減少誤差,。
6、將液體加到酶標孔中時,,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去,。
7,、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,,防止水分的蒸發(fā),。
8、洗板時,,每次洗液加入后,,應靜置1分鐘,使清洗更加*,。沒有洗板機時,,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干,。
9,、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確,。
10,、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
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脂質(zhì)過氧化物(LPO)測試盒62499-27-8天 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
米力農(nóng) 規(guī)格: 100mg
13463-28-0圣草次;Eriocitrin 規(guī)格: 20mg
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桂美 規(guī)格: 50mg
槲皮-3-O-β-D-葡糖糖-7-O- 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
13463-28-0圣草次甙 規(guī)格: HPLC≥98%,,20mg/vial
去甲萬古 規(guī)格: 150mg
2655-14-3除威;純品型;標準品;有證書 規(guī)格: 0.1g
22255-40-9馬錢 規(guī)格: 20mg