詳細介紹
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果,。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素,;
②試劑因素,;
③操作因素,。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,,可提供免費技術(shù)咨詢服務,!
產(chǎn)品名稱:活性氧簇免費代測試劑盒說明
英文名稱:reactive oxygen species
檢測范圍:25IU/mL~800IU/mL
貨號:YS-E987531
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個月,所有試劑盒均提供批次,。
試劑盒成分:酶標板,,試劑,標準品等,。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個標本-2個標準對照-84個樣本
48T指可以做47個標本-1個標準對照-42個樣本
主要成分:酶標板,試劑,標準品等,。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿,、羊,、雞、鴨,、魚,、人、大鼠,、小鼠,、豚鼠、倉鼠,、裸鼠,、兔子、豬,、犬,、猴,、馬、牛等動植物,。
檢測目的:用于測定血清,,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、灌洗液,、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標準品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
樣本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融,。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L | 5 號標準品 | 150µl 的原倍標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號標準品 | 150µl 的 5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
600ng/L | 3 號標準品 | 150µl 的 4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
300ng/L | 2 號標準品 | 150µl 的 3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
150ng/L | 1 號標準品 | 150µl 的 2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
實驗注意事項:
1,、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體,;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次,;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),,浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,,重復此過程數(shù)次,。
2、自動洗板:如果有自動洗板機,,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中,。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果,,因為所有試劑都是有關聯(lián)的,,不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會得到的檢測結(jié)果,。
4,、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,,試劑避免受到微生物的污染,,因為蛋白水解酶的干擾將導致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果,。
5、濃洗滌液會有鹽析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,。
6、剛開啟的酶標板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),,此為正?,F(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響,。
7,、所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置,。
8,、有效期:6個月。
CL-0260BC-021(癌細胞)5×106cells/瓶×2H-Hyp-OMeoHCl反式-4-羥基-L-脯酸鹽酸鹽5克特,,98.0%
胃腺癌細胞;SGC-7901 [SGC7901] 大鼠腦動脈血管平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL乙酰輔酶A三鹽 Acetyl CoA trilithium salt,≥93% 75520-41-1 1MG 通用試劑
MLTC-1 小鼠間質(zhì)細胞瘤細胞言醋拂西汀 Fluoxqtinq xy7nochloridq 29333-67-4
IL5RA Others Human IL5Ra / CD125 細胞裂解液 (陽性對照) Carmine蟲紅1克BR,,99%
酶活性分析試劑盒CAT1415-93-6腐殖酸Humic acid
NIH/3T3, 小鼠成纖維細胞系 腎癌Wilms,G-401細胞 NCI-H1869 [H1869](肺癌細胞)1-乙基-1H--2,5-二酮,,英文名或英文縮寫:NEM,,級別:高,,99%,規(guī)格:25克
結(jié)直腸腺癌細胞;SW620 [SW 620;SW-620]N.O-雙(三基硅烷基)-三拂酰安 Bis(trimqthylsilyl)trifluoroccqtcmidq 2261-30-
ESAM Others Human ESAM 細胞裂解液 (陽性對照) 2-奈酚-1-羧酸,,英文名或英文縮寫:2-xy7noxy-1-naphthoic acid,,級別:超,,99%,規(guī)格:250毫克
SV40T轉(zhuǎn)化的胚腎細胞;293TEZVISIONINGELSOLUTION,10,000XEZ Vision膠內(nèi)溶液0.5MLCOLDPK-COLD
大鼠顆粒細胞(RGC)(1×106)(聚乙二醇6000)
豚鼠皮膚細胞;GP-S3脫羧環(huán)丙沙星Decarboxy Ciprofloxacin質(zhì)量規(guī)格:美國進口
CBLC Others Human Cbl-c / CBL-3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 環(huán)丙沙星-d8鹽酸鹽Ciprofloxacin-d8, 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
腦動脈血管內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)鹽酸環(huán)丙沙星Ciprofloxacin HCl質(zhì)量規(guī)格:美國進口
臍動脈內(nèi)皮細胞 正常胚肺成纖維細胞,,MRC-5細胞 SHZ-88(癌細胞)去乙酰泛昔洛韋Desacetyl Famciclovir質(zhì)量規(guī)格:美國進口
耐VP16絨癌細胞株;JEG-3/VP166-去氧噴昔洛韋6-Deoxypenciclovir質(zhì)量規(guī)格:美國進口
活性氧簇免費代測試劑盒說明卵巢顆粒細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)鄰氯青霉素 ;氯唑西林鈉(標準品)Cloxacillin Salt Monohydrate質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標準品
TNFRSF1B Others Cynomolgus 食蟹猴 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B 細胞裂解液 (陽性對照) 鄰氯青霉素 ;氯唑西林鈉Cloxacillin Salt Monohydrate質(zhì)量規(guī)格:干品Cloxacillin>90%,一水
小鼠血細胞;WEHI-3 [WEHI3]7-Deaza-7-I-2’-dA7-Deaza-7-I-2’-dA質(zhì)量規(guī)格:>97%,進分
HBE細胞,支氣管上皮細胞 小鼠飼養(yǎng)層上皮細胞,HPT-8細胞 CL-0170NG108-15(小鼠神經(jīng)細胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細胞)5×106cells/瓶×22',3'-雙脫氧腺苷(ddA)Dideoxyadenosine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
U251(膠質(zhì)瘤細胞) 5×106cells/瓶×2木糖醇Xylitol質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,AR
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶,。,,酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導大量的催化反應,,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應現(xiàn)象,。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。 24μg/ml 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
12μg/ml 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
6μg/ml 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
3μg/ml 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
1.5μg/ml 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣:分別設空白孔、標準孔,、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,,如此重復5次,,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,,空白孔除外,。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5,。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。