詳細(xì)介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定,。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果,。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素,;
③操作因素,。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢(xún)服務(wù),!
產(chǎn)品名稱(chēng):巨細(xì)胞病毒PP65抗原免費(fèi)代測(cè)試劑盒說(shuō)明
英文名稱(chēng):Cytomegalovirus PP65 antigen
檢測(cè)范圍:0.25ng/mL~8ng/mL
貨號(hào):YS-E989005
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個(gè)月,所有試劑盒均提供批次,。
試劑盒成分:酶標(biāo)板,,試劑,,標(biāo)準(zhǔn)品等,。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個(gè)標(biāo)本-2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-84個(gè)樣本
48T指可以做47個(gè)標(biāo)本-1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-42個(gè)樣本
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯,、鹿,、羊、雞、鴨,、魚(yú),、人、大鼠,、小鼠,、豚鼠、倉(cāng)鼠,、裸鼠,、兔子、豬,、犬,、猴、馬,、牛等動(dòng)植物,。
檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測(cè)包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、灌洗液、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說(shuō)明書(shū) | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個(gè) |
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性,。
2400 ng/L | 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1,、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次,;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,,根據(jù)需要,,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次,。
2、自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測(cè)效果,,因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的,,不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說(shuō)明操作才會(huì)得到的檢測(cè)結(jié)果,。
4,、在儲(chǔ)存及孵育過(guò)程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,,試劑避免受到微生物的污染,,因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。
5,、濃洗滌液會(huì)有鹽析出,,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
6,、剛開(kāi)啟的酶標(biāo)板孔中可能會(huì)有少許水樣物質(zhì),,此為正常現(xiàn)象,,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響,。
7、所有的樣品都應(yīng)管理好,,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置,。
8、有效期:6個(gè)月,。
CM-R076大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL9-氨基米諾環(huán)素鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)9-Amino-minocycline HCl
ADCYAP1R1 Others Human ADCYAP1R1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 阿法替尼質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Afatinib/BIBW2992
小鼠皮膚肥大細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL奈比洛爾鹽酸鹽;奈必洛爾質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRNebivolol
SP2/0小鼠骨髓瘤細(xì)胞 Mouse myeloma cell line SP2/0 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS奈必洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Nebivolol
IL12B Protein Human 重組 IL12B / P40 蛋白 (His 標(biāo)簽)核固紅質(zhì)量規(guī)格:BSNuclear fast red
SERPINA1A Others Mouse 小鼠 Alpha 1 Aiypsin / SerpinA1a 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39),,大鼠質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRACTH (1-39), rat
大鼠腎系膜細(xì)胞;RMC促腎上腺皮質(zhì)激素(18-39),質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRACTH (18-39), human
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS2 細(xì)胞,,HeLa 229細(xì)胞 EAC-E2G8細(xì)胞,,鼠腹水瘤促腎上腺皮質(zhì)激素(4-10),質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRACTH (4-10), human
胚胎心肌組織來(lái)源細(xì)胞;CCC-HEH-2腎臟髓質(zhì)肽(22-52),,質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRAdrenomedullin (22-52),human
POSTN Others Mouse 小鼠 POSTN / OSF2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 促腎上腺皮質(zhì)激素(1-10),,質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRACTH (1-10), human
HUVEC pooled Pellet 臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞混合團(tuán)塊 > 1 mio.cells 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基-2EpiCM-2SDS-PAGEMolecularlowweightmarkersforproteins低分子MARK25克BR,2u/mg
CL-0398NCI-H2452(間皮瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×23-拂本安 3-Fluorocnilinq 37-19-0
CD22 Others Mouse 小鼠 Siglec-2 / CD22 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) PTH1-84重組甲狀旁腺激素1-841克BR,,98%
腦膜細(xì)胞RNAHMC miRNA5 μgDNADNA(魚(yú)精)250毫克BR,,99%
家兔腎細(xì)胞;RABK3 結(jié)腸癌細(xì)胞,COLO 205細(xì)胞 U14-GFP細(xì)胞,,綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠子細(xì)胞144-02-5鈉;二乙基巴比土酸鈉;可溶性巴比通;佛羅拿鈉Barbital wo7ium;5,5-Dietxylbarbituric acid wo7ium salt;wo7ium barbital;wo7ium dietxyl Malonylurea;wo7ium 5,5-dietxylbarbiturate;Soluble barbital;Veronal wo7ium;Medinal
巨細(xì)胞病毒PP65抗原免費(fèi)代測(cè)試劑盒說(shuō)明HUVEC 臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞甲基反亞油酸甲酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品)Methyl linolelaidate質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
CM-H123神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL肉豆蔻酸甲酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))Methyl myristate質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)
PANC-1, 胰腺癌細(xì)胞棕櫚酸甲酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC))Methyl palmitate質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC)
前列腺癌細(xì)胞;DU 145 [DU145;DU-145] 小腦顆粒細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL亞麻酸甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Methyl linolenate質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
前列腺平滑肌細(xì)胞cDNAHPSMC cDNA十一酸甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Methyl undecanoate質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
使用方法:
測(cè)定法的靈敏度來(lái)自作為報(bào)告的酶,。,,酶是一種有機(jī)催化劑,,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱(chēng)為酶放大體系,。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外,。
7. 溫育:操作同3,。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值),。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行,。