通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),,可用蒸餾水自行配制PH7.4,,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液,。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存,。
2、液體全部加完后,,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能,。
3,、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,,應(yīng)盡量避免接觸,。
4、檢測(cè)前,,要打開酶標(biāo)儀,,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5,、吸取液體時(shí),,要用量程和需要量接近的槍去吸,,減少誤差,。
6,、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,,液滴會(huì)自然流下去。
7,、溫浴時(shí),,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā),。
8,、洗板時(shí),每次洗液加入后,,應(yīng)靜置1分鐘,,使清洗更加*。沒有洗板機(jī)時(shí),,倒去液體后,,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9,、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10,、底物是光敏感的,,要在臨用前現(xiàn)配。
我司供應(yīng)的生化檢測(cè)試劑盒,,僅供科研使用,。
產(chǎn)品名稱 | 測(cè)定方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
谷氨酰胺酶(GLS)測(cè)試盒 | 微量法、可見分光光度法 | 100管/96樣 ,、50管/48樣 | BJ-01S85281 |
商品介紹:
測(cè)定意義
GS(EC 6.3.1.2)主要存在于植物中,,是生物體內(nèi)氨同化的關(guān)鍵酶之一,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺,,不僅可以防止過多的銨離子對(duì)生物有毒性,,而且谷氨酰胺也是氨的主要儲(chǔ)存和運(yùn)輸形式。
測(cè)定原理
GS在ATP和Mg2+存在下,,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺,;谷氨酰胺進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為γ─谷氨酰基異羥肟酸,,在酸性條件下與鐵形成紅色的絡(luò)合物,;該絡(luò)合物在540nm處有最大吸收峰,,可用分光光度計(jì)測(cè)定。
所需的儀器和用品
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、水浴鍋,、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器,、微量石英比色皿/96孔板,、研缽、冰和蒸餾水,。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1,、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,,0.02M的磷酸緩沖液,,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存,。
2,、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,,混勻液體,。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3,、底物有一定的毒性,,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸,。
4,、檢測(cè)前,要打開酶標(biāo)儀,,使之穩(wěn)定10分鐘以上,。
5、吸取液體時(shí),,要用量程和需要量接近的槍去吸,,減少誤差。
6,、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,,液滴會(huì)自然流下去,。
7、溫浴時(shí),,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,,防止水分的蒸發(fā),。
8、洗板時(shí),,每次洗液加入后,,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*,。沒有洗板機(jī)時(shí),,倒去液體后,,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干,。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確,。
10、底物是光敏感的,,要在臨用前現(xiàn)配,。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱,。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),,板上應(yīng)加蓋,,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求,。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,,以便 不時(shí)觀察,,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng),。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì),。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度,、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
蛋白處理試劑專題
蛋白活性穩(wěn)定液 10毫升
蛋白飽和溶液 1毫升
動(dòng)物細(xì)胞蛋白融解液 10毫升
細(xì)蛋白融解液 10毫升
蛋白儲(chǔ)存液 10毫升
蛋白變性液 10毫升
膜蛋白溶解緩沖液 10毫升
鹽析法大量蛋白濃縮沉淀試劑盒 5/10次
谷氨酰胺酶(GLS)測(cè)試盒90921-11-2白頭翁 規(guī)格: 10mg
4羊藿 規(guī)格: 20mg
伯利亞遠(yuǎn)志糖A6 規(guī)格: HPLC≥95%;20mg
11041-94-4去甲 規(guī)格: 20mg
2114454 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
23696-28-8喹;喹酰胺 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
1617-53-4穗花杉雙黃 規(guī)格: 20mg
29477-83-6仙環(huán);Narciclasine 規(guī)格: 1mg
6915-15-7蘋果 規(guī)格: 20mg
130-86-9原 規(guī)格: 20mg