我司供應(yīng)的生化檢測(cè)試劑盒,,僅供科研使用,。
商品介紹:
測(cè)定意義:
MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動(dòng)物,、植物,、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,線(xiàn)粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,,催化蘋(píng)果酸形成草酰乙酸,;相反,胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋(píng)果酸,。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物,, 連接多條重要的代謝途徑。因此,,MDH在細(xì)胞多種活動(dòng)中扮演著重要的角色,,包括線(xiàn)粒體的能量代謝、 蘋(píng)果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng),、活性氧代謝和抗病性等,。根據(jù)不同的輔酶特異性,MDH分為NAD-依賴(lài)的MDH和NADP-依賴(lài)的MDH,,細(xì)菌中通常只含有NAD-MDH,,在真核細(xì)胞中,NAD-MDH分布于細(xì)胞質(zhì)和線(xiàn)粒體中,。
測(cè)定原理:
NAD-MDH催化NADH還原草酰乙酸生成蘋(píng)果酸,,導(dǎo)致340nm處光吸收下降。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、臺(tái)式離心機(jī),、水浴鍋,、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水,。
通用規(guī)則:
1,、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,,0.02M的磷酸緩沖液,,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存,。
2,、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,,混勻液體,。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3,、底物有一定的毒性,,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,,應(yīng)盡量避免接觸,。
4、檢測(cè)前,,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5,、吸取液體時(shí),,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差,。
6,、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,,液滴會(huì)自然流下去。
7,、溫浴時(shí),,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā),。
8,、洗板時(shí),每次洗液加入后,,應(yīng)靜置1分鐘,,使清洗更加*。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干,。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確,。
10、底物是光敏感的,,要在臨用前現(xiàn)配,。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),,可用蒸餾水自行配制PH7.4,,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液,。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存,。
2、液體全部加完后,,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能,。
3,、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,,應(yīng)盡量避免接觸,。
4、檢測(cè)前,,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5,、吸取液體時(shí),,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差,。
6,、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,,液滴會(huì)自然流下去。
7,、溫浴時(shí),,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,,防止水分的蒸發(fā)。
8,、洗板時(shí),,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,,使清洗更加*,。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干,。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確,。
10、底物是光敏感的,,要在臨用前現(xiàn)配,。
綠膿測(cè)定用培養(yǎng)基(PDP) 英文名稱(chēng):Pseudomonas Agar P 產(chǎn)品規(guī)格:250g
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基(2015藥典) 英文名稱(chēng):Columbia Blood Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g
梭菌增菌培養(yǎng)基(2015藥典) 英文名稱(chēng):Clostridium enrichment Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g
1%聚山梨酯80-玉米瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱(chēng):1%Tween 80-Corn Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g
沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱(chēng):Sabouraud’s Glucose Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g
沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基 英文名稱(chēng):Sabouraud’s Glucose Broth Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g
膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱(chēng): 產(chǎn)品規(guī)格:250g
碘液 英文名稱(chēng): 產(chǎn)品規(guī)格:2ml*20支
0.1%煌綠 英文名稱(chēng): 產(chǎn)品規(guī)格:1ml*20
氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱(chēng):Mannitol Salt Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g
NAD-蘋(píng)果酸脫氫酶(NAD-MDH)測(cè)試盒7660-25-5果糖 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
地膚子皂Ic 規(guī)格: 20mg
121-79-9沒(méi)食子丙酯;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) 規(guī)格: 0.25g
137-08-6 規(guī)格: 20mg
458-37-7姜黃 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
87-52-5蘆竹 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
貓爪草 規(guī)格: 1g
29956-99-8化天竺葵;Di-tert-octyl 規(guī)格: 10mg
123-11-5大茴香醛 規(guī)格: 20mg
553-21-9木香烴內(nèi)酯 規(guī)格: HPLC≥98%,,20mg/vial
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱,。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起,。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求,。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,,以便 不時(shí)觀察,,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng),。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì),。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度,、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法,。