詳細介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定,。 但ELISA測定中影響因素較多,,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,,有時常見到一些錯誤的結(jié)果,。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素,;
③操作因素,。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù),!
產(chǎn)品名稱:神經(jīng)酰胺免費代測試劑盒
英文名稱:ceramide
檢測范圍:5μmol/L~160μmol/L
貨號:YS-E987961
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個月,所有試劑盒均提供批次,。
試劑盒成分:酶標(biāo)板,,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等,。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個標(biāo)本-2個標(biāo)準(zhǔn)對照-84個樣本
48T指可以做47個標(biāo)本-1個標(biāo)準(zhǔn)對照-42個樣本
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯,、鹿,、羊、雞,、鴨,、魚、人,、大鼠,、小鼠、豚鼠,、倉鼠,、裸鼠、兔子,、豬,、犬、猴,、馬,、牛等動植物。
檢測目的:用于測定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水,、灌洗液、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,,提取后應(yīng)盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
2400 ng/L | 5 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實驗注意事項:
1,、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次,;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,,根據(jù)需要,,重復(fù)此過程數(shù)次。
2,、自動洗板:如果有自動洗板機,,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
3,、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果,,因為所有試劑都是有關(guān)聯(lián)的,不能混用其他商的產(chǎn)品,。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會得到的檢測結(jié)果,。
4、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中,。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,,試劑避免受到微生物的污染,因為蛋白水解酶的干擾將導(dǎo)致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果,。
5,、濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,。
6,、剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,,不會對實驗結(jié)果造成任何影響,。
7、所有的樣品都應(yīng)管理好,,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置,。
8、有效期:6個月,。
表皮角化細胞*培養(yǎng)基 100mLO-去甲基加蘭他敏質(zhì)量規(guī)格:美國進口O-Desmethyl Galanthamine
CFSC-2G細胞,,大鼠肝星形細胞 7721(7721肝癌細胞) tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6O-去甲基加蘭他敏β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格:美國進口O-Desmethyl Galanthamine β-D-Glucuronide
EFNB3 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 (His 標(biāo)簽)異吉非羅齊(吉非羅齊雜質(zhì))質(zhì)量規(guī)格:美國進口iso-Gemfibrozil (Gemfibrozil Impurity)
Y1(Y-1) (小鼠腎上腺皮質(zhì)細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠細胞白血病;L1210吉非羅齊1-O-β-葡萄糖苷酸-d6質(zhì)量規(guī)格:美國進口Gemfibrozil 1-O-β-Glucuronide-d6
山羊腎上皮樣細胞;DG-K1N-去甲基昂丹司瓊質(zhì)量規(guī)格:美國進口N-Demethyl Ondansetron
BCAM Others Human BCAM 細胞裂解液 (陽性對照) GENEPAGE29:1,4.5%*CLDPAK* 4.5% GENE-PAGE 29:1, 6 M 尿素生物技術(shù)級5X100MLCOLD
小鼠表皮角質(zhì)形成細胞*培養(yǎng)基 100mL二酰氧基典本 (Diccqtoxyiodo)bqnzqnq 340-34-4
THP1-Blue (穩(wěn)定株)單核細胞 THP1-Blue (stable sain) in human monocytes 1640+10% FBS(熱滅活)+200ug/ml Zeocin+0.05mM β-ME亮安醋腦非肽;L-酪安酰甘安酰甘安酰-L-本炳安酰-L-柏安醋;柏安醋腦非肽 Lqucinq qnkqphclin;[5-Lqucinq] qnkqphclin;qnkqphclin L;[Lqu5]qnkqphclin 81678-16-
IL17A Protein Human 重組 IL17 / IL17A 蛋白UREA,8MSOLUTION尿素蛋白組學(xué)級250ML57-13-6COLD
脈絡(luò)絲成纖維細胞 (HCPF)( 5×105 ) HUVEC, 臍靜脈內(nèi)皮細胞 Caco-2,結(jié)直腸腺癌細胞2645-8-1N-本甲?;?/span>-L-精酸乙酯鹽酸鹽etxyl N-benzoyl-L-argininate xy7nochloride
臍靜脈內(nèi)皮細胞(膀胱癌細胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304]霉酚酸β-D-葡萄糖苷酸Mycophenolic Acid β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
HA Others H4N6 甲型流感 H4N6 (A/mallard/Ohio/657/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細胞裂解液 (陽性對照) 霉酚酸?;?/span> β-D-葡萄糖苷酸Mycophenolic Acid Acyl-β-D-glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細胞HAMSC阿莫西林-d4Amoxicillin-d4質(zhì)量規(guī)格:美國進口
MME Others Cynomolgus 食蟹猴 CD10 / Neprilysin / MME 細胞裂解液 (陽性對照) 阿莫西林三水合物Amoxicillin trihydrate質(zhì)量規(guī)格:美國進口
非洲綠猴腎細胞(SV40轉(zhuǎn)化);COS-1 [COS1]二氫非諾貝特Dihydro Fenofibrate質(zhì)量規(guī)格:美國進口
神經(jīng)酰胺免費代測試劑盒BRL-3A(大鼠正常肝細胞) 5×106cells/瓶×2雷洛昔芬-d4Raloxifene-d4質(zhì)量規(guī)格:美國進口
CPE Others Human CPE 細胞裂解液 (陽性對照) 雷洛昔芬6-葡萄糖苷酸Raloxifene 6-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
多聚賴氨酸10 mg/mlPLL(+)-兒茶素水合物(+)-Catechin hydrate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,進分
CRELD2 Others Mouse 小鼠 CRELD2 細胞裂解液 (陽性對照) (+)-兒茶素水合物(標(biāo)準(zhǔn)品)(+)-Catechin hydrate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細胞;JEG-3/VP16-IL-2(+)-兒茶素(標(biāo)準(zhǔn)品)(+)-Catechin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶,。,,酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象,。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。 24μg/ml 5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外,。
7. 溫育:操作同3,。
8. 洗滌:操作同5,。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測定:以空白空調(diào)零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。