測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱,。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起,。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中,。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求,。 如室溫高于20℃,,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,,待對照管顯色適當(dāng)時(shí),,即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵,。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,,在定性測定中一般 可采用目視比色,。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度,、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法,。
我司供應(yīng)的生化檢測試劑盒,僅供科研使用,。
商品介紹:
測定意義:
核酮糖-1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶(EC 4.1.1.39)是植物光合作用中的一個(gè)關(guān)鍵酶,既控制著CO2的固定,,同時(shí)又制約著碳素向Calvin循環(huán)和光呼吸循環(huán)分流,,其活性的大小直接影響著光合速率。
測定原理:
在Rubisco的催化下,,1分子的核酮糖-1,,5-二磷酸(RuBP)與1分子的CO2結(jié)合,產(chǎn)生2分子的3-磷酸甘油酸(PGA),,PGA可通過外加的3-磷酸甘油酸激酶和甘油醛-3-磷酸脫氫酶的作用,,產(chǎn)生甘油醛-3-磷酸,并使還原型輔酶I(NADH)氧化,。因此,,340nm吸光度的變化可計(jì)算還原型輔酶I氧化速率,還原型輔酶I氧化速率可反應(yīng)Rubisco的活性,。
需自備的儀器和用品:
分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋,、可調(diào)式移液器,、微量石英比色皿/96孔板、研缽,、冰和蒸餾水,。
通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),,可用蒸餾水自行配制PH7.4,,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液,。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存,。
2、液體全部加完后,,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能,。
3,、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,,應(yīng)盡量避免接觸,。
4、檢測前,,要打開酶標(biāo)儀,,使之穩(wěn)定10分鐘以上,。
5、吸取液體時(shí),,要用量程和需要量接近的槍去吸,,減少誤差,。
6,、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,,液滴會(huì)自然流下去。
7,、溫浴時(shí),,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā),。
8,、洗板時(shí),每次洗液加入后,,應(yīng)靜置1分鐘,,使清洗更加*。沒有洗板機(jī)時(shí),,倒去液體后,,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9,、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10,、底物是光敏感的,,要在臨用前現(xiàn)配。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1,、洗液不夠時(shí),,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,,加入0.1%的吐溫20作為洗液,。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2,、液體全部加完后,,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體,。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能,。
3,、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,,應(yīng)盡量避免接觸,。
4、檢測前,,要打開酶標(biāo)儀,,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5,、吸取液體時(shí),,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差,。
6,、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,,液滴會(huì)自然流下去。
7,、溫浴時(shí),,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā),。
8,、洗板時(shí),每次洗液加入后,,應(yīng)靜置1分鐘,,使清洗更加*。沒有洗板機(jī)時(shí),,倒去液體后,,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9,、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10,、底物是光敏感的,,要在臨用前現(xiàn)配。
小鼠神經(jīng)肽Y(NPY)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠骨鈣素(OC/BGP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
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小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠促甲狀腺素(TSH)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠甲狀腺素(T4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
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小鼠基質(zhì)金屬抑制因子2(TIMP-2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠基質(zhì)金屬抑制因子3(TIMP-3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
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二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)測試盒65-19-0育亨賓;Yohimbine hydr 規(guī)格: 20mg
480-41-1柚皮 規(guī)格: 20mg
厄 規(guī)格: 50mg
3馬錢;Brucine 規(guī)格: 20mg
110623-73-9朝藿定B 規(guī)格: 20mg
84-26-4吳茱萸次 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
35575-96-3甲基磷;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 規(guī)格: 0.1g
14534-61-33,4-二啡??鼘?規(guī)格: HPLC≥98%,,20mg/vial
胡黃連 規(guī)格: 0.5g
55399-93-4羥基異亮氨 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg