AMP激活蛋白激酶β1(PRKAb1)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品：泛酸激酶4(PANK4)重組蛋白 物種,； Homo sapiens (Human,，人) 來源,； 原核表達 性狀：凍干粉 二肽基肽酶9(DPP9)重組蛋白 物種,； Homo sapiens (Human,，人) 來源； 原核表達 性狀：凍干粉 磷酸二酯酶4B(PDE4B)重組蛋白 物種,； Rattus norvegicus (Rat,，大鼠) 來

標(biāo)簽選擇：

親和標(biāo)簽：蛋白重組表達過程中采用親和標(biāo)簽融合表達有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,；另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類：一類是短肽類標(biāo)簽,；一類是長肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達,。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,，大致步驟如下：

真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體和宿主細胞（常用的CHO和HEK293）

b.      表達載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細胞瞬時轉(zhuǎn)染

e.      表達小試,，條件優(yōu)化

f.       表達分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）

g.      大量表達

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

僅供科研實驗產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Protein Kinase, AMP Activated Beta 1 (PRKAb1)

AMPK; HAMPKb; 5'-AMP-Activated Protein Kinase Subunit Beta-1 Non-Catalytic Subunit; Adenosine Monophosphate Activated Protein Kinase(AMPK)

酶與激酶 代謝通路

物種：Homo sapiens (Human,，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：細胞核, 細胞質(zhì)

預(yù)測分子量：55.9kDa

實際分子量：55.89kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Arg13~Leu242 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：5.5

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

相關(guān)產(chǎn)品：

拓撲異構(gòu)酶Ⅲβ(TOP3b)重組蛋白 物種,； Homo sapiens (Human，人) 來源,； 原核表達 性狀：凍干粉 脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)重組蛋白 物種,； Bos taurus; Bovine (Cattle，牛) 來源,； 原核表達 性狀：凍干粉 龍蝦肽酶樣金屬內(nèi)肽酶(ASTL)重組蛋白 物種,； Homo sapiens (Human，人) 來源,； 原核表達 性狀：凍干粉

原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達菌株

e.      蛋白表達小試分析

f.       如果蛋白可溶,，蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶，則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白,。

h.      鑒定,，包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白；表達蛋白的分析,、純化,、檢測

　　誘導(dǎo)表達成功后，表達蛋白的分析,、純化,、檢測應(yīng)該順當(dāng)，按一般的實驗步驟做沒太大的問題,。

操作步驟 ：

根據(jù)使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,。混勻備用（PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加）,。

1,、樣品前處理：

a)對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細胞充分接觸,。

b)對于懸浮細胞：離心收集細胞,，用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,，再用手指輕彈以充分裂解細胞,。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,，必需分裝成 50-100 萬細胞/管,，然后再裂解。

c)對于組織樣品： 切成細小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品,，可以適當(dāng)減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解,。

2,、后處理：

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清,，即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作,。

破傷風(fēng)梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Clostridium tetaniPCR 50T

普雷沃菌屬通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Prevotella spp.PCR 50T

氣單胞菌通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Aeromonas spp.PCR 50T

羌蟲病立克次氏體PCR檢測試劑盒 英文名稱; Rickettsia tsutsugamushiPCR 50T

PDGF-BB 小鼠血小板衍生生長因子-BBMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-APOA1 載脂蛋白A1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-rat IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG 規(guī)格 0.1ml

SC(Human secretory component) ELISA Kit 人分泌成分 96T

SOCS5 英文名稱： 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5抗體 0.1ml

C21orf91 英文名稱： 21號染色體開放閱讀框91抗體 0.2ml

Anti-APOA1 載脂蛋白A1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

AMP激活蛋白激酶β1(PRKAb1)重組蛋白同豬皰疹病毒型偽狂犬病病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Pseudorabies Virus(PrV,，1)PCR

同豬皰疹病毒Ⅰ型奧葉茲基氏病病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Aujeszky's Disease Virus(ADV，Ⅰ)PCR

同豬嵴病毒梅拉哥病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Menangle Virus（）RTPCR

同詹姆士城峽谷病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Jerry Slough Virus（JSV,，) RTPCR

注意事項：  

1,、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間,。

2,、雖然作用溫和，但能硬化組織,，固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時,。

3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,，使之不能充分暴露,，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果,。因此,，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復(fù),，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作,。

4、本產(chǎn)品對人體有害,，操作時請小心,，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5,、為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作