產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 說明書 |
---|---|---|---|
應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 用于科研 |
英文名稱 | Recombinant Beta-1,4-Galactosyltransferase 1 | 物種 | Homo sapiens (Human,,人) |
來源 | 原核表達(dá) | 應(yīng)用 | Cell culture; Activity Assa |
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上海研生實業(yè)有限公司 |
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15201736385 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-04-10 11:46:18瀏覽次數(shù):278
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 說明書 |
---|---|---|---|
應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 用于科研 |
英文名稱 | Recombinant Beta-1,4-Galactosyltransferase 1 | 物種 | Homo sapiens (Human,,人) |
來源 | 原核表達(dá) | 應(yīng)用 | Cell culture; Activity Assa |
標(biāo)簽選擇:
親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá),。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析,。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:
真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達(dá)載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染
e. 表達(dá)小試,,條件優(yōu)化
f. 表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達(dá)
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 性狀 | 來源 |
β-1,4-半乳糖轉(zhuǎn)移酶1(b4GALT1)重組蛋白 | Homo sapiens (Human,,人) | 凍干粉 | 原核表達(dá) |
英文名稱:Recombinant Beta-1,4-Galactosyltransferase 1 (b4GALT1)
GTB; B4-GALT1; GGTB2; GT1; Beta4Gal-T1; Lactose Synthase A Protein; N-Acetyllactosamine Synthase; Nal synthase; beta-N-acetylglucosamine beta-1,4-galactosyltransferase 1
信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 酶與激酶 代謝通路
物種:Homo sapiens (Human,,人)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜, 分泌, 高爾基體
預(yù)測分子量:43.0kDa
實際分子量:44kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Arg45~Ser398 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點:8.4
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg
相關(guān)產(chǎn)品:
纖溶酶/抗纖溶酶復(fù)合體(PAP)真核蛋白 物種; Homo sapiens (Human,,人) 來源,; 真核表達(dá) 性狀:凍干粉 拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(TOP2)重組蛋白 物種; Mus musculus (Mouse,,小鼠) 來源,; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉 牛痘相關(guān)激酶2(VRK2)重組蛋白 物種; Mus musculus (Mouse,,小鼠) 來源,; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉
原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株
e. 蛋白表達(dá)小試分析
f. 如果蛋白可溶,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白,。
h. 鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白,;表達(dá)蛋白的分析,、純化、檢測
誘導(dǎo)表達(dá)成功后,,表達(dá)蛋白的分析,、純化、檢測應(yīng)該順當(dāng),,按一般的實驗步驟做沒太大的問題,。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加),。
1,、樣品前處理:
a)對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細(xì)胞充分接觸,。
b)對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散,。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀,。如果細(xì)胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,,然后再裂解。
c)對于組織樣品: 切成細(xì)小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當(dāng)減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解,。
2,、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作,。
犬副流感病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Canine Parainfluenza Virus(CPIV)RTPCR 50T
犬皰疹病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Canine Herpes Virus PCR 50T
饒氏無綠藻PCR檢測試劑盒 英文名稱; Prototheca zopfiiPCR 50T
人分枝桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Mycobacterium hominisPCR 50T
PDGF-BB peptide 血小板源性生長因子-BB抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-ATP5J ATP5J抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-ANAPC1 (Ser355) 0酸化細(xì)胞周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體 規(guī)格 0.1ml
p27 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
UCP-3 英文名稱: 線粒體脫偶連蛋白3抗體 0.1ml
Defensin beta 2 英文名稱: 防御素β2/Defensin β2抗體 0.1ml
Anti-ATP5J ATP5J抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
β-1,4-半乳糖轉(zhuǎn)移酶1(b4GALT1)重組蛋白同白斑綜合癥病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; White Spot Syndrome Virus(WSSV,,MBV)PCR
同艾特韋病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Egtved Virus(VHSV)RTPCR
通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; LentivirusRTPCR
停乳鏈球菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Streptococcus dysgalactiaePCR
注意事項:
1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間,。
2、雖然作用溫和,,但能硬化組織,,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時,。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果,。因此,,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),,然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作,。
4、本產(chǎn)品對人體有害,,操作時請小心,,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。
5、為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作