詳細介紹
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產品名稱:M14(黑色素瘤細胞)
規(guī)格:5×106cells
貨號:YS-02X9792
產品分類:細胞系
儲存條件2℃-8℃,,避光儲存
運輸條件冰袋冷藏運輸
注意事項
1,、使用產品時應注意無菌操作,避免污染,。
2,、本產品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,,可以直接使用,。
3、為保持本產品的最佳使用效果,,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中,。
4、所有產品請于保質期內使用,,超出保質期,,必須放棄使用。
5,、本產品只供進一步科研使用,,不可應用于臨床等其他方面。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶,;8ml小牛血清(FCS) 1瓶,;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個,; 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3,、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個,,細胞培養(yǎng)瓶1個
5,、1ml ,200μl移液器各1支,;槍頭盒2個,;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊,;
7,、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把,;
8,、酒精燈1臺;
細胞復蘇步驟:
1:水浴鍋預熱至37℃?zhèn)溆?/span>
2:準備15mL離心管,,并向其中加入適量培養(yǎng)基待用
3:將細胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出,,放入PE手套中,迅速投入水浴鍋
4:用力搖晃凍存管,使其在1分鐘內融化
5:用紙巾擦拭水漬,,轉移至生物安全柜,。用移液槍吸取細胞懸液,緩慢滴加到步驟2中準備好的離心管
6:1200rpm離心3分鐘
7:棄上清,,用新鮮培養(yǎng)基重懸細胞,,接種至新的無菌培養(yǎng)器皿中
小鼠15脂加氧(15-LO)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠神經(jīng)型一氧化氮合(NOS1/nNOS)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠腦指蛋白(BFP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠S100鈣結合蛋白A9 (S100A9) 聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠S100鈣結合蛋白A8 (S100A8) 聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠S100鈣結合蛋白A10 (S100A10) 聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠ⅡD組磷脂A2(PLA2G2D)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠胞漿型磷脂A2(cPLA2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠鈣非依賴性磷脂A2(iPLA2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠網(wǎng)狀蛋白4(RTN4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠抗環(huán)胍氨酸肽抗體(ACCPA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠β-黑色素細胞刺(βMSH)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
小鼠α1(Ta1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
M14(黑色素瘤細胞)509-20-6原;Aconine 規(guī)格: 20mg
39262-14-1人參皂CK 規(guī)格: 20mg
布地奈德 規(guī)格: 100mg
83905-01-5阿奇;Azithromycin 規(guī)格: 100mg
632-85-9漢黃芩 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
慶大C1a 規(guī)格: 50mg
15401-69-1小檗紅 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
半邊蓮對照藥材 規(guī)格: 1g
41743-73-1次野鳶尾黃 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
58546-55-7五味子酯乙 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
細胞培養(yǎng)方法:
1,、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),,使胰酶覆蓋整個瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化,;若細胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補加適量培養(yǎng)基。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化,;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,,放入-80℃冰箱,,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。