產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 說明書 |
---|---|---|---|
應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 用于科研 |
英文名稱 | Recombinant Poly ADP Ribose Polymerase 4 (PAR | 物種 | Homo sapiens (Human,人) |
來源 | 原核表達(dá) | 來源 | 應(yīng)用 Cell culture; Activity Assa |
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上海研生實業(yè)有限公司 |
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15201736385 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-04-10 13:21:58瀏覽次數(shù):617
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 說明書 |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 用于科研 |
英文名稱 | Recombinant Poly ADP Ribose Polymerase 4 (PAR | 物種 | Homo sapiens (Human,人) |
來源 | 原核表達(dá) | 來源 | 應(yīng)用 Cell culture; Activity Assa |
相關(guān)產(chǎn)品:
異檸檬酸脫氫酶1(IDH1)重組蛋白 物種,; Mus musculus (Mouse,,小鼠) 來源; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉 巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶1(FUT1)重組蛋白 物種,; Homo sapiens (Human,,人) 來源; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉 透明質(zhì)酸酶(HAase)重組蛋白 物種,; Homo sapiens (Human,,人) 來源; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉
僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 性狀 | 來源 |
多聚ADP核糖聚合酶4(PARP4)重組蛋白 | Homo sapiens (Human,,人) | 凍干粉 | 原核表達(dá) |
英文名稱:Recombinant Poly ADP Ribose Polymerase 4 (PARP4)
ADPRTL1; ARTD4; PARPL; PH5P; VAULT3; VPARP; P193; VWA5C; von Willebrand Factor A Domain Containing 5C; ADP-ribosyltransferase diphtheria toxin-like 4; Vault polymerase
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,,人)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::細(xì)胞核, 細(xì)胞質(zhì)
預(yù)測分子量:34.2kDa
實際分子量:40kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Val338~Thr609 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點:5.9
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg
標(biāo)簽選擇:
親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽,;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析,。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:
真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達(dá)載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染
e. 表達(dá)小試,條件優(yōu)化
f. 表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達(dá)
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株
e. 蛋白表達(dá)小試分析
f. 如果蛋白可溶,,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。
h. 鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白,;表達(dá)蛋白的分析,、純化、檢測
誘導(dǎo)表達(dá)成功后,,表達(dá)蛋白的分析,、純化、檢測應(yīng)該順當(dāng),,按一般的實驗步驟做沒太大的問題,。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加),。
1,、樣品前處理:
a)對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細(xì)胞充分接觸,。
b)對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散,。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀,。如果細(xì)胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,然后再裂解,。
c)對于組織樣品: 切成細(xì)小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,,直至充分裂解,。
2、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,,取上清,,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作,。
普氏立克次氏體PCR檢測試劑盒 英文名稱; Rickettsia prowazekiiPCR 50T
禽波氏桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Bordetella avium PCR 50T
禽腺病毒通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Fowl Adenovirus(FAdV)PCR 50T
犬小孢子菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Microsporum canis PCR 50T
p27 (cyclin-dependent kinase inhibitor 1B) p27(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Integrin alpha 2/CD49b 整合素α2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh P45017A1/Cytochrome P450 17A1 P450 17A1抗體 規(guī)格 0.1ml
CR2 Kit Human 人 CD21 ELISA配對抗體 ELISA
TBL1Y 英文名稱: 轉(zhuǎn)導(dǎo)β樣蛋白1抗體 0.2ml
C6orf64 英文名稱: 6號染色體開放閱讀框64抗體 0.2ml
Anti-Integrin alpha 2/CD49b 整合素α2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
多聚ADP核糖聚合酶4(PARP4)重組蛋白人支原體PCR檢測試劑盒 英文名稱; Mycoplasma hominisPCR
人乳頭瘤病毒通用·PCR檢測試劑盒 英文名稱; Human Papillomavirus (HPV)·PCR
人葡萄球菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Staphylococcus hominisPCR
人偏肺病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Human Metapneumo Virus(hMPV )RTPCR
注意事項:
1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間,。
2、雖然作用溫和,,但能硬化組織,,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時,。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結(jié)果。因此,,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時,,有時需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作,。
4,、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。
5、為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作