產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 說明書 |
---|---|---|---|
應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 用于科研 |
英文名稱 | Recombinant Lipase, Gastric (LIPF) | 物種 | Homo sapiens (Human,人) |
來源 | 原核表達(dá) | 應(yīng)用 | Cell culture; Activity Assa |
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上海研生實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-04-10 13:44:18瀏覽次數(shù):653
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 說明書 |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 用于科研 |
英文名稱 | Recombinant Lipase, Gastric (LIPF) | 物種 | Homo sapiens (Human,人) |
來源 | 原核表達(dá) | 應(yīng)用 | Cell culture; Activity Assa |
相關(guān)產(chǎn)品:
組蛋白脫乙?;?span>1(HDAC1)活性蛋白 物種,; Homo sapiens (Human,人) 來源,; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉 脂肪酸去飽和酶2(FADS2)重組蛋白 物種,; Homo sapiens (Human,人) 來源,; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉 血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)活性蛋白 物種,; Homo sapiens (Human,人) 來源,; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉
僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 性狀 | 來源 |
胃脂酶(LIPF)重組蛋白 | Homo sapiens (Human,,人) | 凍干粉 | 原核表達(dá) |
英文名稱:Recombinant Lipase, Gastric (LIPF)
HGL; HLAL; Gastric lipase
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測分子量:73.2kDa
實(shí)際分子量:73.2kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Leu20~Lys398 with N-terminal His and GST Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點(diǎn):-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg
標(biāo)簽選擇:
親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽,;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá),。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:
真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達(dá)載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染
e. 表達(dá)小試,,條件優(yōu)化
f. 表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達(dá)
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株
e. 蛋白表達(dá)小試分析
f. 如果蛋白可溶,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白,。
h. 鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白,;表達(dá)蛋白的分析,、純化、檢測
誘導(dǎo)表達(dá)成功后,,表達(dá)蛋白的分析,、純化、檢測應(yīng)該順當(dāng),,按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題,。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,?;靹騻溆茫?span>PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。
1,、樣品前處理:
a)對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸,。
b)對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞,。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,,然后再裂解。
c)對于組織樣品: 切成細(xì)小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當(dāng)減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解,。
2,、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作,。
熱帶念珠菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Candida tropicalisPCR 50T
人皰疹病毒型通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Human Herpesvirus6(HHV6)6PCR 50T
乳酸桿菌屬通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Lactococcus spp. PCR 50T
山羊關(guān)節(jié)炎腦脊髓炎病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Caprine Arthritisencephalitis Virus(CAEV)PCR 50T
ompF(putative outer membrane porin F protein) 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌膜通道蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-ARIP2a 激活素受體2A抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ASK1(Ser967) 0酸化細(xì)胞凋亡信號調(diào)節(jié)1抗體 規(guī)格 0.2ml
uPA 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
UBTD1 英文名稱: 泛素結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 0.2ml
DPH2 英文名稱: 白喉酰胺生物合成樣蛋白2抗體 0.2ml
Anti-ARIP2a 激活素受體2A抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
胃脂酶(LIPF)重組蛋白禽輪狀病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Avian Rotavirus(ARV)RTPCR
禽類支原體通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Avian Mycoplasma spp.PCR
禽類肉瘤病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Avian Sarcoma Virus(ASV)RTPCR
禽結(jié)核分枝桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Mycobacterium avianPCR
注意事項(xiàng):
1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間,。
2,、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時,。
3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結(jié)果,。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時,,有時需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),,然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。
4,、本產(chǎn)品對人體有害,,操作時請小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。
5,、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作