產品簡介
供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 說明書 |
---|---|---|---|
應用領域 | 化工 | 主要用途 | 用于科研 |
英文名稱 | Recombinant Cytochrome P450 Reductase (CPR) | 物種 | Homo sapiens (Human,,人) |
來源 | 原核表達 | 應用 | Cell culture; Activity Assa |
![]() |
上海研生實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-04-10 13:47:52瀏覽次數:509
聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!
供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 說明書 |
---|---|---|---|
應用領域 | 化工 | 主要用途 | 用于科研 |
英文名稱 | Recombinant Cytochrome P450 Reductase (CPR) | 物種 | Homo sapiens (Human,,人) |
來源 | 原核表達 | 應用 | Cell culture; Activity Assa |
標簽選擇:
親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽,;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達,。使用不同的蛋白標簽需要根據具體案例來分析。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:
真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達載體的構建
c. 無內毒素的質粒抽提
d. 細胞瞬時轉染
e. 表達小試,,條件優(yōu)化
f. 表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
僅供科研實驗產品屬性:
產品名稱 | 物種 | 性狀 | 來源 |
細胞色素P450氧化還原酶(CPR)重組蛋白 | Homo sapiens (Human,人) | 凍干粉 | 原核表達 |
英文名稱:Recombinant Cytochrome P450 Reductase (CPR)
POR; CYPOR; P450R; P450(Cytochrome)Oxidoreductase; NADPH--cytochrome P450 reductase
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,,人)
來源:原核表達
宿主E.coli
內毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::細胞膜
預測分子量:53.3kDa
實際分子量:53kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Gly77~Phe518 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點:5.0
應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg
相關產品:
組蛋白脫乙?;?span>11(HDAC11)重組蛋白 物種; Mus musculus (Mouse,,小鼠) 來源,; 原核表達 性狀:凍干粉 中性葡糖苷酶αAB(GaNAB)活性蛋白 物種; Homo sapiens (Human,,人) 來源,; 原核表達 性狀:凍干粉 氧鯊烯環(huán)化酶(OSC)重組蛋白 物種,; Homo sapiens (Human,,人) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉
原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉化表達菌株
e. 蛋白表達小試分析
f. 如果蛋白可溶,,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,,則需要變復性來制備可溶蛋白。
h. 鑒定,,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白,;表達蛋白的分析、純化,、檢測
誘導表達成功后,,表達蛋白的分析、純化,、檢測應該順當,,按一般的實驗步驟做沒太大的問題。
操作步驟 :
根據使用量,,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫?span>PMSF 現用現加),。
1、樣品前處理:
a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,,用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下,,使裂解液和細胞充分接觸,。
b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散,。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀,。如果細胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,然后再裂解,。
c)對于組織樣品: 切成細小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,,直至充分裂解,。
2、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,,取上清,,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作,。
嗜冷黃桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Flavobacterium psychrophilumPCR 50T
睡眠嗜血桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Haemophilus somnusPCR 50T
塔卡里伯病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Tacaribe Virus(TCRV)RTPCR 50T
同白斑綜合癥病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; White Spot Syndrome Virus(WSSV,MBV)PCR 50T
OLFM1 peptide 嗅球蛋白1多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5ml
Anti-Beta-arrestin 1 β-抑制蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ASK1(Ser83) 0酸化細胞凋亡信號調節(jié)1抗體 規(guī)格 0.1ml
Tubulin-Beta 濃縮液 0.1ml 進口分裝
UQCRFS1 英文名稱: 質子梯度調節(jié)蛋白1抗體 0.2ml
DNMBP 英文名稱: 動力結合蛋白DNMBP抗體 0.2ml
Anti-Beta-arrestin 1 β-抑制蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
細胞色素P450氧化還原酶(CPR)重組蛋白禽副粘病毒型PCR檢測試劑盒 英文名稱; Avian Paramyxovirus 1(APMV)1RTPCR
禽副粘病毒通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Avian Paramyxovirus (APMV)RTPCR
禽痘病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Avian Pox virus(=Fowl Pox Virus,、FPV)PCR
禽傳染性支氣管炎病毒型PCR檢測試劑盒 英文名稱; Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)ArkRTPCR
注意事項:
1,、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應當根據細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間,。
2,、雖然作用溫和,但能硬化組織,,固定時間過久會導致組織變脆,,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時,。
3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構象出現空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結果,。因此,,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復,,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作,。
4、本產品對人體有害,,操作時請小心,,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。
5,、為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作