羧肽酶A1(CPA1)重組蛋白公司正在銷售的產(chǎn)品：HAVCR2重組小鼠 TIM3 / HAVCR2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
核糖體蛋白L23A(RPL23A)重組蛋白 Recombinant Ribosomal Protein L23A (RPL23A)
TMED4重組人 TMED4 / ERS25 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ACRV1 Protein Human 重組

僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Carboxypeptidase A1, Pancreatic (CPA1)

酶與激酶

物種：Rattus norvegicus (Rat,，大鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測分子量：27.7kDa

實(shí)際分子量：28kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Thr205~Tyr419 with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4,，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

標(biāo)簽選擇：

親和標(biāo)簽：蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,；另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標(biāo)簽可分兩類：一類是短肽類標(biāo)簽；一類是長肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達(dá),。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析,。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的，大致步驟如下：

真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟：

a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞（常用的CHO和HEK293）

b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

e.      表達(dá)小試,，條件優(yōu)化

f.       表達(dá)分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）

g.      大量表達(dá)

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟：

a.      選擇表達(dá)載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

e.      蛋白表達(dá)小試分析

f.       如果蛋白可溶,，蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶，則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白,。

h.      鑒定,，包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白；表達(dá)蛋白的分析,、純化,、檢測

　　誘導(dǎo)表達(dá)成功后，表達(dá)蛋白的分析,、純化,、檢測應(yīng)該順當(dāng)，按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題,。

注意事項(xiàng)：  

1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間,。

2,、雖然作用溫和，但能硬化組織,，固定時(shí)間過久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,，切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過 24 小時(shí),。

3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色,，影響免疫組化結(jié)果,。因此，4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時(shí),，有時(shí)需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),，然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作,。

4、本產(chǎn)品對人體有害,，操作時(shí)請小心,，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5,、為了您的安全和健康,，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作

相關(guān)產(chǎn)品：

核糖體蛋白L23A(RPL23A)重組蛋白 Recombinant Ribosomal Protein L23A (RPL23A)

ACRV1 Protein Human 重組人 SP-10 / ACRV1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HAVCR2重組小鼠 TIM3 / HAVCR2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

ANGPTL7 Protein Canine 重組狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 蛋白 (His 標(biāo)簽)

TMED4重組人 TMED4 / ERS25 蛋白

操作步驟 ：

根據(jù)使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,。混勻備用（PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加）,。

1,、樣品前處理：

a)對于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,，使裂解液和細(xì)胞充分接觸,。

b)對于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散,。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,，再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀,。如果細(xì)胞量較多,，必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管，然后再裂解,。

c)對于組織樣品： 切成細(xì)小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,，如果需要高濃度的蛋白樣品,，可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,，直至充分裂解,。

2、后處理：

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,，取上清,，即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作,。

副百日咳波氏桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Bordetella parapertussisPCR 50T

戈?duì)柕侠詹《?span>PCR檢測試劑盒 英文名稱; Gordil VirusRTPCR 50T

哈特帕克病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Hart Park VirusRTPCR 50T

黑色普雷沃菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Prevotella melaninogenicaPCR 50T

NRF-1(nuclear respiratory factor-1) 核呼吸因子-1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-Arfaptin 2 ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-ATF2(Ser44) 0酸化活化復(fù)制因子2抗體 規(guī)格 0.1ml

EGFR-R 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝

UBAP1 英文名稱： 泛素相關(guān)蛋白1抗體(鼻咽癌相關(guān)基因20蛋白) 0.2ml

DHRS7B 英文名稱： 短鏈脫氫酶/還原酶家族7B抗體 0.2ml

Anti-Arfaptin 2 ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

羧肽酶A1(CPA1)重組蛋白牛赤羽病病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Akabane Disease Virus(ADV)RTPCR

牛腸道病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Bovine Enterovirus（BEV）RTPCR

牛腸杯狀病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Bovine Enteric Calicivirus（BECV）RTPCR

牛布魯氏桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Brucella bovisPCR