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雙腎上腺皮質(zhì)激素樣激酶1(DCLK1)重組蛋白

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更新時間:2023-04-10 15:25:51瀏覽次數(shù):337

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 說明書
應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 用于科研
英文名稱 Recombinant Doublecortin Like Kinase 1 (DCLK1 物種 Homo sapiens (Human,,人)
來源 原核表達(dá) 應(yīng)用 Cell culture; Activity Assa
雙腎上腺皮質(zhì)激素樣激酶1(DCLK1)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:HA重組甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/35820/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
PERK(PRKR-like endoplasmic reticulum kinase 0.5mgPERK(PRKR-like endoplasmic reticulum k

詳細(xì)介紹

相關(guān)產(chǎn)品:

PERK(PRKR-like endoplasmic reticulum kinase 0.5mgPERK(PRKR-like endoplasmic reticulum kinase) 蛋白激酶R樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶抗原

ADA Protein Human 重組人 ADA / Adenosine deaminase 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HA重組甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/35820/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

C P

僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

性狀

來源

雙腎上腺皮質(zhì)激素樣激酶1(DCLK1)重組蛋白

Homo sapiens (Human,,人)

凍干粉

原核表達(dá)

英文名稱:Recombinant Doublecortin Like Kinase 1 (DCLK1)

DCDC3A; DCLK; DCAMKL1; Doublecortin And CaM Kinase-Like 1; Doublecortin domain-containing protein 3A; Doublecortin-like and CAM kinase-like 1

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::n/a

預(yù)測分子量:32.7kDa

實(shí)際分子量:30kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Tyr390~Val647 with

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% TrehaloseProclin300.

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點(diǎn):-

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

1.png

標(biāo)簽選擇:

親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá),。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析,。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHOHEK293

b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染

e.      表達(dá)小試,,條件優(yōu)化

f.       表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAEWB

g.      大量表達(dá)

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

e.      蛋白表達(dá)小試分析

f.       如果蛋白可溶,,蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白,。

h.      鑒定,,包括SDS-PAGEWB鑒定

GZMH蛋白;表達(dá)蛋白的分析,、純化,、檢測

  誘導(dǎo)表達(dá)成功后,表達(dá)蛋白的分析,、純化,、檢測應(yīng)該順當(dāng),按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題,。

操作步驟 :

根據(jù)使用量,,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF zui終濃度為 1mM,?;靹騻溆茫?span>PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

1,、樣品前處理:

a)對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細(xì)胞充分接觸,。

b)對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散,。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞,。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,,然后再裂解。

c)對于組織樣品: 切成細(xì)小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當(dāng)減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解,。

2,、后處理:

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGEWestern blotting 和免疫沉淀等操作,。

腺病毒通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Adenovirus(AV)PCR 50T

新加坡石斑魚虹彩病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Singapore Grouper Iridovirus(SGIV)PCR 50T

鴨肝炎病毒型PCR檢測試劑盒 英文名稱; Duck Hepatitis Virus 3(DHV3)3RTPCR 50T

羊痘病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Capripox VirusPCR 50T

NPY(humen) 人神經(jīng)肽YMulti-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-C Peptide C-肽抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh NME1/Nm23-H1/NDKA 抑制基因抗體 規(guī)格 0.1ml

Human Centromere Protein,CENP-B ELISA Kit 人著絲粒蛋白B 96T

TSPAN15 英文名稱: 四分子交聯(lián)體15抗體(四旋蛋白) 0.2ml

CSK 英文名稱: 酪酸C-SRC抗體 0.2ml

Anti-C Peptide C-肽抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

雙腎上腺皮質(zhì)激素樣激酶1(DCLK1)重組蛋白腦膜炎敗血金黃桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Chryseobacterium meningsepticumPCR

腦膜蠕蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Parelaphostrongylus teniusPCR

腦多頭囊蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Coenurus cerebralisPCR

腦胞內(nèi)原蟲屬通用·PCR檢測試劑盒 英文名稱; Encephalitozoon spp.·PCR

注意事項(xiàng):  

1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間,。

2,、雖然作用溫和,但能硬化組織,,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時,。

3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結(jié)果,。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時,,有時需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),,然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

4,、本產(chǎn)品對人體有害,,操作時請小心,,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5,、為了您的安全和健康,,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作


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